本文關(guān)鍵詞：重組人腸道病毒71型疫苗效價測定方法建立及免疫原性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立重組人腸道病毒71型(EV71)疫苗效價測定方法以及免疫原性研究。方法:將BALB/c小鼠按不同周齡、免疫途徑和免疫劑量分組,共5組,分別于d天免疫,14、21、28 d采血,采用經(jīng)典微量細胞病變法進行EV71中和抗體陽轉(zhuǎn)率的檢測。另外將6~8周齡小鼠分成6組(10只·組-1),劑量范圍(1~0.0312μg),0 d免疫,28 d采血進行中和抗體效價測定,同時取脾淋巴細胞采用ELISPOT法測定經(jīng)體外刺激分泌IFN-γ的水平,并取細胞上清液采用ELISA法測定分泌IFN-γ,IL-2和IL-4的水平。結(jié)果:通過比較各組血清中和抗體陽轉(zhuǎn)率可以得出:效價測定最佳條件為:6~8周齡雌性BALB/c小鼠,免疫途徑為腹腔注射,0 d免疫,28 d采血,劑量范圍0.5~0.0039μg。BALB/c小鼠經(jīng)1次免疫后,EV71疫苗組小鼠血清中和抗體效價呈劑量效應(yīng)關(guān)系,所有EV71疫苗組小鼠脾淋巴細胞分泌的IFN-γSFC值均顯著高于佐劑組(P0.01);EV71疫苗組分泌IFN-γ和IL-2水平顯著高于佐劑組(P0.05),并且EV71疫苗組也能分泌一定量的IL-4。經(jīng)統(tǒng)計分析,ELISPOT法與ELISA法檢測IFN-γ水平的結(jié)果高度相關(guān)(r=0.751)。結(jié)論:建立了一種重組腸道病毒71型疫苗效價測定的方法,EV71疫苗能夠使BALB/c小鼠產(chǎn)生具有劑量效應(yīng)關(guān)系的體液免疫反應(yīng),并且還能誘導(dǎo)BALB/c小鼠脾淋巴細胞產(chǎn)生特異性IFN-γ、IL-2和IL-4細胞免疫反應(yīng)的應(yīng)答,為后續(xù)的EV71疫苗研發(fā)及質(zhì)量控制提供了一定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 上海澤潤生物科技有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 人腸道病毒型 疫苗效價測定 中和抗體 體液免疫 細胞免疫 免疫原性研究
【基金】：上海市科學(xué)技術(shù)委員會"創(chuàng)新行動計劃"項目(10431903500)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)是兒童常見病,多種腸道病毒均可引起手足口病,其中以腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒A16型(CA16)最為常見。EV71屬于小RNA病毒科腸道病毒屬,為危害程度僅次于脊髓灰質(zhì)炎病毒的嗜神經(jīng)性腸道病毒[1]。EV71導(dǎo)致的手足口病

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 毛群穎;何鵬;于祥;李楠;郝春生;高強;董承紅;梁爭論;李鳳翔;沈心亮;王軍志;;人腸道病毒71型中和抗體檢測方法的實驗室評價[J];中國生物制品學(xué)雜志;2010年08期

2 毛群穎;郭增兵;郝春生;于丹;高帆;董承紅;安文琪;高強;謝忠平;李秀玲;梁爭論;;腸道病毒71型中和抗體檢測用標準病毒候選株的篩選及制備[J];中國生物制品學(xué)雜志;2012年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王文廣;黃曉燕;徐娟;孫曉梅;代解杰;李琦涵;;EV71可感染幼齡中緬樹，

本文編號：508348