本文關(guān)鍵詞：α1抗胰蛋白酶突變體ATZ過表達(dá)增強(qiáng)細(xì)胞自噬水平，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的觀察α1抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,AAT)Z型突變體(α1-antitrypsin Z variant,ATZ)表達(dá)對(duì)細(xì)胞自噬水平的影響,探討ATZ細(xì)胞毒作用的可能機(jī)制。方法體外培養(yǎng)人胚腎細(xì)胞株HEK 293T并轉(zhuǎn)染ATZ真核表達(dá)質(zhì)粒,利用Western blot法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3和p62的表達(dá),免疫熒光染色觀察LC3的細(xì)胞定位,real-time PCR法檢測(cè)自噬相關(guān)基因Atg5、Atg12和Beclin1的變化,DAB染色觀察ATZ過表達(dá)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響。結(jié)果與轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒對(duì)照組相比,ATZ過表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞自噬的標(biāo)志分子LC3由LC3-Ⅰ轉(zhuǎn)變?yōu)長(zhǎng)C3-Ⅱ,p62水平降低;而經(jīng)自噬抑制劑氯化銨處理后,ATZ過表達(dá)細(xì)胞中出現(xiàn)LC3點(diǎn)狀聚集,p62水平增加;同時(shí),ATZ過表達(dá)明顯增加自噬相關(guān)基因Atg5、Atg12的mRNA水平,而對(duì)Beclin1無明顯影響;少量表達(dá)ATZ的細(xì)胞形態(tài)基本正常,細(xì)胞中LC3形成點(diǎn)狀聚集;反之,過度表達(dá)ATZ的細(xì)胞核變小、固縮甚至消失,無LC3-Ⅱ表達(dá)。結(jié)論過表達(dá)ATZ通過增加Atg5和Atg12表達(dá)激活自噬,這可能與其細(xì)胞毒性有一定相關(guān)性。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;安徽醫(yī)科大學(xué)生物藥物研究所;安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： α抗胰蛋白酶Z型突變體 自噬 p LC Bec-lin 細(xì)胞毒性
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81100247,81302755,91129729)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： α1抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,AAT)屬于絲氨酸蛋白酶超家族成員,由肝細(xì)胞合成和分泌,可以抑制包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、凝血酶等多種蛋白酶活性,但其主要作用是通過血液循環(huán)擴(kuò)散到肺部,保護(hù)肺組織彈力纖維免受中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的水解和破壞[1]。AAT缺乏癥是一種常染色體

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉賢德;周欣亮;單保恩;桑梅香;陳文雪;;細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)機(jī)制與選擇性降解(英文)[J];徐州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年04期

2 趙萍;王攀;王筱冰;;程序性細(xì)胞死亡與腫瘤[J];生命科學(xué);2011年04期

3 劉影;劉韓菡;李勝;;果蠅變態(tài)過程中的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞自噬[J];昆蟲知識(shí);2009年05期

4 吳燕婉;劉德瑜;;溶酶體的細(xì)胞死亡通路[J];解剖學(xué)報(bào);2007年04期

5 王娟;時(shí)迎娣;楊懷義;;乙肝病毒感染對(duì)細(xì)胞基本自噬的影響[J];微生物學(xué)報(bào);2010年12期

6 席興字;;細(xì)胞自噬與衰老[J];生命的化學(xué);2011年02期

7 王燕;劉玉樂;;植物細(xì)胞自噬研究進(jìn)展[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2010年05期

8 王海燕;倪濤;謝志平;;酵母中細(xì)胞自噬的研究進(jìn)展[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2010年06期

9 錢帥偉;漆正堂;丁樹哲;;哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白通路與細(xì)胞自噬[J];生命科學(xué);2011年08期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 郭濱;線蟲全基因組篩選細(xì)胞自噬活性調(diào)控基因[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

2 赫榮琳;TrATG5基因?qū)锸夏久股L(zhǎng)發(fā)育的影響[D];浙江大學(xué);2009年

3 章晟;SARS-CoV 3a蛋白以及炭疽致死毒素誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

4 孟春春;ClassⅠ新城疫弱毒的毒力演化及自噬在新城疫病毒感染腫瘤細(xì)胞中的作用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

5 劉玉濤;釀酒酵母中TRAPP復(fù)合體的三個(gè)亞基在囊泡運(yùn)輸和細(xì)胞自噬中的功能研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 崔曉東;rBTI的內(nèi)化及誘導(dǎo)Hep G2細(xì)胞自噬的研究[D];山西大學(xué);2012年

7 楊愛民;Neuronostatin對(duì)痛覺、胃腸運(yùn)動(dòng)和情緒的影響及脂基化蛋白LC3-Ⅱ的半合成[D];蘭州大學(xué);2013年

8 周偉;納米材料引發(fā)的保護(hù)性自噬及miRNA在納米材料誘發(fā)自噬中的作用研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 薛丹鳳;天然小分子化合物X15-2誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的研究[D];安徽大學(xué);2014年

2 蔡金洋;造血系統(tǒng)上下游細(xì)胞自噬機(jī)制的構(gòu)架以及功能的比較研究[D];蘇州大學(xué);2014年

3 魯書玲;里氏木霉Trichoderma reesei自噬相關(guān)基因TrATG5的克隆與功能分析[D];浙江大學(xué);2008年

4 孫軻婧;幾種材料引起細(xì)胞自噬的相關(guān)生物學(xué)功能研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2009年

5 周奇峰;朊病毒蛋白對(duì)細(xì)胞自噬的影響及可能的作用方式[D];蘭州大學(xué);2009年

  本文關(guān)鍵詞：α1抗胰蛋白酶突變體ATZ過表達(dá)增強(qiáng)細(xì)胞自噬水平，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：499220