本文關(guān)鍵詞：腸出血性大腸桿菌O157∶H7變種Q蛋白對志賀毒素表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：1株腸出血性大腸桿菌O15 7∶H7變種EC169菌株,攜帶stx基因但不表達(dá)志賀毒素。通過高效熱不對稱交錯(cuò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(high-efficiency thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,hiTAIL-PCR)hiTAILPCR擴(kuò)增得到EC169 stx1及其上游核苷酸片段并克隆測序,結(jié)果表明:EC169 q基因與標(biāo)準(zhǔn)株sakai q基因相比存在6個(gè)SNP位點(diǎn)。通過PCR擴(kuò)增O157∶H7高毒株EC150 q基因全長,并構(gòu)建表達(dá)載體pkk223-q分別轉(zhuǎn)化EC169和低毒株EC157。反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源q基因在EC169和EC157重組菌中可高效表達(dá),并引起EC157stx轉(zhuǎn)錄水平上調(diào),但EC169重組菌stx轉(zhuǎn)錄水平不變。反向乳膠凝集實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦證實(shí)EC157重組菌志賀毒素表達(dá)量提高,而EC169重組菌志賀毒素表達(dá)量不變。Q蛋白變異可能并非EC169志賀毒素不表達(dá)的主要原因。
【作者單位】： 武漢輕工大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院;河南醫(yī)藥技師學(xué)院制藥工程系;武漢輕工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 大腸桿菌O∶H Q蛋白 反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR 志賀毒素 hiTAIL-PCR
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(2012AA101703-3) 教育部留學(xué)回國人員科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(教外司留20111139) 湖北省教育廳優(yōu)秀中青年人才計(jì)劃項(xiàng)目(Q20111710) 武漢市科技局國際科技合作計(jì)劃項(xiàng)目(2013030409020113)
【分類號】：R378.2
【正文快照】： 腸出血性大腸桿菌O157∶H7是一類十分重要的食源性致病菌,感染人體后會(huì)出現(xiàn)腹痛、腹瀉、惡心或嘔吐,部分患者還會(huì)有發(fā)熱癥狀出現(xiàn)。可引起胃腸道以及全身性的疾病,如出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征,臨床表現(xiàn)為溶血性貧血、急性腎衰竭、凝血功能障礙、血小板減少等[1-2]。感染嚴(yán)

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：腸出血性大腸桿菌O157∶H7變種Q蛋白對志賀毒素表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：492471