本文關(guān)鍵詞：大鼠脊髓少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定方法，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討大鼠脊髓少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(OPCs)的分離純化及誘導(dǎo)分化方法。方法取出生后3 d內(nèi)SD大鼠脊髓,采用0.125%胰蛋白酶消化獲取原代混合膠質(zhì)細(xì)胞,培養(yǎng)10 d左右在37℃恒溫?fù)u床采取180 r/min搖速振搖并差速貼壁40 min獲得純化的OPCs;取純化后培養(yǎng)3 d的OPCs免疫熒光鑒定細(xì)胞純度或誘導(dǎo)分化。結(jié)果采用胰蛋白酶消化法獲取原代混合膠質(zhì)細(xì)胞、振搖并差速貼壁法分離純化能夠得到純度較高的OPCs,折光性強(qiáng),呈雙極或三極形態(tài),免疫熒光染色顯示95%細(xì)胞表達(dá)A2B5和NG2(OPCs標(biāo)志物),經(jīng)誘導(dǎo)分化后表達(dá)O4及MBP(少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物)。結(jié)論采用振搖差速貼壁法可從大鼠脊髓中分離純化獲得高純度的OPCs,獲得的OPCs體外生長穩(wěn)定,經(jīng)誘導(dǎo)可分化為成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 脊髓 細(xì)胞培養(yǎng) 免疫熒光
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81000521,81030021)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 隨著現(xiàn)代化進(jìn)程,交通及建筑事業(yè)的迅速發(fā)展,脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)的發(fā)病率急劇上升。SCI導(dǎo)致原發(fā)性機(jī)械損傷和損傷區(qū)缺血缺氧導(dǎo)致的繼發(fā)性級聯(lián)損傷[1,2],其中缺血缺氧使少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocytes,OLs)大量死亡,引發(fā)廣泛的脫髓鞘病變,造成不可逆性的神經(jīng)功能

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  本文關(guān)鍵詞：大鼠脊髓少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定方法，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：476927