本文關(guān)鍵詞：hi FGF2真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其高表達(dá)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建hi FGF2(high molecular weight isoform fibroblast growth factor-2,hi FGF2)真核表達(dá)載體,并觀察其過表達(dá)后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。方法設(shè)計(jì)合成hi FGF2 cDNA模板引物,Nhel和Hind III雙酶切pDsRed1-N1質(zhì)粒,T4DNA連接酶重組hi FGF2質(zhì)粒,PCR擴(kuò)增目的基因,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)及測(cè)序鑒定。將重組hi FGF2質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,熒光倒置顯微鏡檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。AnnexinV-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果 hi FGF2真核表達(dá)載體符合設(shè)計(jì)要求,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率達(dá)70%以上。過表達(dá)hi FGF2,HEK293細(xì)胞FITC/PI雙染陽(yáng)性率達(dá)(29.12±2.81)%,與正常組、轉(zhuǎn)染空載體組差別有顯著性(P0.01或P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建hi FGF2真核表達(dá)載體,過表達(dá)hi FGF2導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。
【作者單位】： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院;汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 高分子量堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 真核表達(dá)載體 轉(zhuǎn)染 細(xì)胞凋亡 HEK細(xì)胞 流式細(xì)胞術(shù)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 30901810) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 9151503102000013)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果hiFGF2真核表達(dá)載體符合設(shè)計(jì)要求,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率達(dá)70%以上。過表達(dá)hi FGF2,HEK293細(xì)胞FITC/PI雙染陽(yáng)性率達(dá)(29.12±2.81)%,與正常組、轉(zhuǎn)染空載體組差別有顯著性(P0.01或P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建hiFGF2真核表達(dá)載體,過

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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8 唐昊U

本文編號(hào)：476732