本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌脂聚糖的分離、純化及其結(jié)構(gòu)和功能分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】建立分離、純化分枝桿菌脂聚糖的方法,初步比較分析不同菌株來(lái)源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的結(jié)構(gòu)差異及研究脂聚糖刺激對(duì)巨噬細(xì)胞環(huán)氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表達(dá)的影響。【方法】應(yīng)用Triton X-114液相法提取脂聚糖,電洗脫法分離純化,基質(zhì)輔助激光解析電離串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF-MS)進(jìn)行分子量鑒定;基于特異性識(shí)別非還原性末端α-D-甘露糖基的刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)分析新諾分枝桿菌JDM601、結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株和恥垢分枝桿菌mc2155脂聚糖的結(jié)構(gòu)差異;進(jìn)一步用Western blot檢測(cè)脂聚糖刺激的RAW 264.7巨噬細(xì)胞COX-2蛋白的表達(dá)�！窘Y(jié)果】通過電洗脫法成功純化出3種菌株脂聚糖;MALDI-TOF/TOF-MS鑒定發(fā)現(xiàn),分子量從小到大依次為新諾分枝桿菌JDM601、恥垢分枝桿菌mc2155和結(jié)核分枝桿菌H37Rv來(lái)源的脂聚糖。Western blot顯示,Con A能與結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株來(lái)源的LAM相互作用,而不能與新諾分枝桿菌JDM601和恥垢分枝桿菌來(lái)源的LAM相互作用;并且發(fā)現(xiàn)Con A與新諾分枝桿菌JDM601來(lái)源的LM有很強(qiáng)的反應(yīng),然而與其余兩種來(lái)源的LM反應(yīng)很弱。3種菌株來(lái)源的脂聚糖均能刺激RAW 264.7巨噬細(xì)胞COX-2蛋白的表達(dá)�！窘Y(jié)論】首次成功對(duì)來(lái)源于中國(guó)臨床分枝桿菌分離株的脂聚糖進(jìn)行了分離純化,初步探討了不同菌株來(lái)源分枝桿菌脂聚糖的結(jié)構(gòu)差異,并表明LAM和LM均能刺激巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)COX-2蛋白的表達(dá),為進(jìn)一步研究其對(duì)宿主的毒力和免疫機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河南中醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;武漢工業(yè)學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 分枝桿菌 脂阿拉伯甘露聚糖 脂甘露聚糖 基質(zhì)輔助激光解析電離串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81271794) 上海市科委科技支撐項(xiàng)目(No.12441903300)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病是結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染病,目前結(jié)核病仍然是單一病原體所致死亡的主要原因。WHO的數(shù)據(jù)表明2010年世界結(jié)核病患病人數(shù)為880萬(wàn),死亡110萬(wàn),而中國(guó)2010年結(jié)核病患病人數(shù)達(dá)90萬(wàn)-120萬(wàn),仍是世界第二大結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家[1]。與此同時(shí),非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculous myc

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 鄒運(yùn);林文鋒;張舒林;;結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁糖復(fù)合物研究進(jìn)展[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年11期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 Chadwick WV;分枝桿菌(續(xù)二)[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1986年01期

2 李曉明,莊玉輝,黃蓉蓉;抗分枝桿菌單克隆抗體的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1992年04期

3 程繼忠,皇甫永穆,馮作化,梁駒卿,肖紅;人結(jié)核桿菌熱休克蛋白70啟動(dòng)子對(duì)外源基因在分枝桿菌中表達(dá)的影響[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1997年06期

4 陳圣光,宋秀蘭,王燕雪;188株分枝桿菌菌種初步鑒定與藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析[J];中國(guó)防癆雜志;1999年04期

5 盧賢瑜;鑒別人型、牛型結(jié)核桿菌和其他分枝桿菌的選擇抑制放射測(cè)定試驗(yàn)[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;1986年05期

6 劉思國(guó),苑純秀,何昭陽(yáng);分枝桿菌與人類的克隆氏病[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1997年01期

7 李國(guó)利!100091北京,莊玉輝!100091北京,趙銘!100091北京,王國(guó)治,陳保文,沈小兵,胡忠義;聚合酶鏈反應(yīng)-反向斑點(diǎn)雜交鑒定分枝桿菌菌種[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2000年04期

8 匡鐵吉;王利平;;分枝桿菌全合成瓊脂培養(yǎng)基的研究[J];微生物學(xué)報(bào);1989年01期

9 趙桂芳;非典型分枝桿菌感染與診斷[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;1995年01期

10 呂斌,徐順清,符志軍,陳志飛,周宜開;重組分枝桿菌噬菌體檢測(cè)分枝桿菌活力的研究[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2000年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 謝建平;劉雪梅;冀磊;王洪海;;分枝桿菌毒素Mycolactone的生物合成及其系統(tǒng)進(jìn)化[A];第八屆中國(guó)生物毒素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

2 李威;馬郁芳;;用基因剔除技術(shù)證明rmlB和rmlC基因是分枝桿菌的生長(zhǎng)相關(guān)基因[A];第八屆全國(guó)復(fù)合糖生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要論文集[C];2004年

3 陳小蘋;楊致幫;謝煒娟;;膿腫分枝桿菌對(duì)理化因子抵抗力的研究[A];第6次全國(guó)微生物學(xué)與免疫學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

4 遲磊;劉思國(guó);王春來(lái);宮強(qiáng);趙昆;劉建東;王勇;云孟克;劉慧芳;趙福廣;;禽分枝桿菌副結(jié)核亞種map0862和map2154c基因的串聯(lián)重組表達(dá)及其活性[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第七次研討會(huì)論文集[C];2008年

5 路福平;田琳;;分枝桿菌甾酮C_(1,2)位脫氫酶的基因敲除[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

6 張秀華;劉思國(guó);宮強(qiáng);王春來(lái);王牟平;彭永剛;沈國(guó)順;郭洋;郭設(shè)平;;牛分枝桿菌mpb64基因的克隆、鑒定及其表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第六次研討會(huì)論文集[C];2005年

7 姜秀云;王春鳳;王春芳;何昭陽(yáng);;牛分枝桿菌MPB70基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

8 謝建平;何穎;胡昌華;樂軍;王洪海;;快生型分枝桿菌分泌性鐵載體exochelin表達(dá)的遺傳調(diào)控[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

9 李俊明;;結(jié)核分枝桿菌異檸檬酸裂合酶對(duì)分枝桿菌胞內(nèi)存活的影響及其相關(guān)機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

10 曾以申;周光宇;;}0菌的P／O比值UO楲[A];中國(guó)生理科學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編（生物化學(xué)）[C];1964年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 南報(bào);“地貧”基因檢測(cè)芯片有望明年面世[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱新星;分枝桿菌基因組信息分析平臺(tái)的設(shè)計(jì)、構(gòu)建和實(shí)現(xiàn)[D];浙江大學(xué);2009年

2 王星;表皮葡萄球菌和分枝桿菌生物膜相關(guān)基因的鑒定和功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

3 梁建琴;應(yīng)用膜反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)快速鑒定分枝桿菌菌種和耐藥結(jié)核分枝桿菌基因型[D];北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所;2005年

4 李傳友;結(jié)核分枝桿菌黏附素HBHA的制備及其應(yīng)用研究[D];北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所;2005年

5 朱中元;結(jié)核DNA疫苗的構(gòu)建、免疫功能及保護(hù)效果研究[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 魏巍;Mycobacterium neoaurum NwIB-01降解甾醇母核關(guān)鍵酶3-甾酮-△~1-脫氫酶和3-甾酮-9α-羥化酶基因的鑒定及其基因工程改造[D];華東理工大學(xué);2010年

7 金越;分枝桿菌wecA基因的功能研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

8 張曉影;源于一種纖維單胞菌的聚阿拉伯糖內(nèi)切酶的分離純化及部分性質(zhì)的鑒定[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

9 史朝為;針對(duì)膜蛋白結(jié)構(gòu)解析的核磁共振方法發(fā)展和應(yīng)用[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2013年

10 焦新安;重組卡介苗誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫應(yīng)答的分子、細(xì)胞機(jī)理研究[D];揚(yáng)州大學(xué);1999年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉晶波;應(yīng)用微列陣技術(shù)快速鑒定常見致病性分枝桿菌[D];蘇州大學(xué);2010年

2 李艷冰;分枝桿菌菌種鑒定及北京家族蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究[D];中南大學(xué);2011年

3 丁辰;分枝桿菌蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的預(yù)測(cè)研究[D];電子科技大學(xué);2013年

4 張峰;Toll樣受體2在分枝桿菌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡中的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

5 高詩(shī)會(huì);結(jié)核分枝桿菌新核酸標(biāo)識(shí)的ISSR分型篩選及在鑒別檢測(cè)中的初步應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2013年

6 馬慧;基于噬菌體展示結(jié)合肽和納米探針的結(jié)核桿菌檢測(cè)新方法研究[D];蘇州大學(xué);2013年

7 黃巍;分枝桿菌甾酮C_（1，，2）位脫氫酶的初步研究[D];天津科技大學(xué);2005年

8 楊華;結(jié)核分枝桿菌異檸檬酸裂解酶aceA基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及融合蛋白的研究[D];寧夏醫(yī)學(xué)院;2006年

9 吳冬婷;murA基因?qū)Ψ种U菌生長(zhǎng)相關(guān)性的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

10 王志剛;膿腫分枝桿菌非溶血性磷脂酶C的克隆表達(dá)及活性鑒定[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌脂聚糖的分離、純化及其結(jié)構(gòu)和功能分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：458527