本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌脂聚糖的分離、純化及其結(jié)構(gòu)和功能分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】建立分離、純化分枝桿菌脂聚糖的方法,初步比較分析不同菌株來源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的結(jié)構(gòu)差異及研究脂聚糖刺激對巨噬細(xì)胞環(huán)氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表達(dá)的影響。【方法】應(yīng)用Triton X-114液相法提取脂聚糖,電洗脫法分離純化,基質(zhì)輔助激光解析電離串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF-MS)進(jìn)行分子量鑒定;基于特異性識別非還原性末端α-D-甘露糖基的刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)分析新諾分枝桿菌JDM601、結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株和恥垢分枝桿菌mc2155脂聚糖的結(jié)構(gòu)差異;進(jìn)一步用Western blot檢測脂聚糖刺激的RAW 264.7巨噬細(xì)胞COX-2蛋白的表達(dá)�！窘Y(jié)果】通過電洗脫法成功純化出3種菌株脂聚糖;MALDI-TOF/TOF-MS鑒定發(fā)現(xiàn),分子量從小到大依次為新諾分枝桿菌JDM601、恥垢分枝桿菌mc2155和結(jié)核分枝桿菌H37Rv來源的脂聚糖。Western blot顯示,Con A能與結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株來源的LAM相互作用,而不能與新諾分枝桿菌JDM601和恥垢分枝桿菌來源的LAM相互作用;并且發(fā)現(xiàn)Con A與新諾分枝桿菌JDM601來源的LM有很強(qiáng)的反應(yīng),然而與其余兩種來源的LM反應(yīng)很弱。3種菌株來源的脂聚糖均能刺激RAW 264.7巨噬細(xì)胞COX-2蛋白的表達(dá)。【結(jié)論】首次成功對來源于中國臨床分枝桿菌分離株的脂聚糖進(jìn)行了分離純化,初步探討了不同菌株來源分枝桿菌脂聚糖的結(jié)構(gòu)差異,并表明LAM和LM均能刺激巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)COX-2蛋白的表達(dá),為進(jìn)一步研究其對宿主的毒力和免疫機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河南中醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;武漢工業(yè)學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 分枝桿菌 脂阿拉伯甘露聚糖 脂甘露聚糖 基質(zhì)輔助激光解析電離串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81271794) 上海市科委科技支撐項(xiàng)目(No.12441903300)
【分類號】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病是結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染病,目前結(jié)核病仍然是單一病原體所致死亡的主要原因。WHO的數(shù)據(jù)表明2010年世界結(jié)核病患病人數(shù)為880萬,死亡110萬,而中國2010年結(jié)核病患病人數(shù)達(dá)90萬-120萬,仍是世界第二大結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家[1]。與此同時(shí),非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculous myc

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：458527