IFN-γ增強(qiáng)脂肪干細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2017-06-16 01:04
本文關(guān)鍵詞:IFN-γ增強(qiáng)脂肪干細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:脂肪源性干細(xì)胞(Adipose -derived stem cells, ADSCs)可以向成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等分化。脂肪干細(xì)胞由于具備易于獲取等特點(diǎn),在組織工程中比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有更加廣闊的應(yīng)用前景,并因此成為當(dāng)今的研究熱點(diǎn)之一。脂肪源性干細(xì)胞與間充質(zhì)干細(xì)胞不但具有非常近似的生物學(xué)性質(zhì),而且在細(xì)胞表面標(biāo)志譜的表達(dá)方面也十分接近。觀察脂肪干細(xì)胞的生長(zhǎng)規(guī)律,鑒定其干細(xì)胞特性和免疫學(xué)性質(zhì)。探索脂肪源性干細(xì)胞表面白細(xì)胞抗原Ⅱ類分子的表達(dá)以及其免疫原性和免疫調(diào)節(jié)作用,并探討其具體機(jī)制是通過什么途徑誘導(dǎo)的。方法:分離培養(yǎng)脂肪源性干細(xì)胞,并用γ型干擾素刺激,然后用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表面免疫分子白細(xì)胞抗原Ⅱ的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western bolt分別檢測(cè)吲哚胺-2,3-雙加氧酶基因(Indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO)和蛋白的表達(dá)。脂肪源性干細(xì)胞單向刺激淋巴細(xì)胞,觀察細(xì)胞增殖情況。淋巴細(xì)胞用植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA)刺激后,加入1×102-1×105脂肪源性干細(xì)胞,觀察淋巴細(xì)胞增殖情況:同時(shí),1×102-1×105脂肪源性干細(xì)胞作為“第三者”細(xì)胞加入混合雙向淋巴細(xì)胞反應(yīng)體系中,同樣觀察淋巴細(xì)胞增殖情況。結(jié)果:所獲脂肪干細(xì)胞具有很強(qiáng)的體外增殖能力,其生長(zhǎng)曲線呈“S”形;第3代脂肪干細(xì)胞表面CD29、CD44、 CD90以及主要組織相容性抗原Ⅰ呈陽(yáng)性表達(dá),CD31、CD45、CD34及主要組織相容性抗原Ⅱ呈陰性表達(dá);未發(fā)現(xiàn)異體脂肪干細(xì)胞刺激淋巴細(xì)胞增殖。脂肪干細(xì)胞低表達(dá)白細(xì)胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2,3-雙加氧酶,但在γ型干擾素IFN-γ刺激后,白細(xì)胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2,3-雙加氧酶表達(dá)均明顯上調(diào)。脂肪源性干細(xì)胞不能刺激淋巴細(xì)胞增殖,但能抑制植物血凝素或異體淋巴細(xì)胞導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞增殖,且脂肪源性干細(xì)胞與混合淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)的上清中檢測(cè)到大量Y型干擾素的表達(dá)。結(jié)論:提示所獲得細(xì)胞為脂肪干細(xì)胞,且具有較弱的排斥反應(yīng),有可能成為細(xì)胞治療或組織工程的同種異體細(xì)胞來源;提示脂肪干細(xì)胞具有低免疫原性,同時(shí)可在體外抑制淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),添加外源性γ型干擾素有助于脂肪源性干細(xì)胞發(fā)揮免疫抑制作用。
【關(guān)鍵詞】:脂肪干細(xì)胞 免疫抑制 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng) γ型干擾素(IFN-γ)
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R329.2
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,本文編號(hào):453950
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