發(fā)布時(shí)間：2017-06-15 15:11

  本文關(guān)鍵詞：胞外高濃度ATP誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞的自噬和凋亡，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察胞外高濃度ATP損傷人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞的作用,探討損傷中自噬和凋亡發(fā)生的規(guī)律和特點(diǎn)。方法:培養(yǎng)的SH-SY5Y細(xì)胞按照加入ATP的濃度和作用時(shí)間進(jìn)行分組。CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞生存率,單丹磺酰戊二胺染色檢測(cè)自噬空泡的變化,Hoechst 33258染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率變化,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表達(dá)。結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比,不同濃度(3、6、9、12、15 mmol/L)的ATP作用3 h均使SH-SY5Y細(xì)胞存活率明顯降低,且呈劑量依賴(lài)性;不同作用時(shí)間(1、2、3、6 h)ATP(6 mmol/L)也可使SHSY5Y細(xì)胞存活率明顯降低,3 h達(dá)高峰,呈時(shí)間依賴(lài)性。(2)ATP作用1 h時(shí)SH-SY5Y細(xì)胞自噬空泡顯著增多(P0.05),隨時(shí)間延長(zhǎng),6 h時(shí)降到對(duì)照水平;ATP作用1 h時(shí),LC3-Ⅱ表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.05),形成高峰,與自噬空泡增多的時(shí)點(diǎn)重合,2 h、3 h時(shí)LC3-Ⅱ表達(dá)水平逐漸減弱,6 h時(shí)降到對(duì)照水平。(3)與對(duì)照組相比,ATP作用3 h后細(xì)胞凋亡率達(dá)高峰(P0.05),6 h時(shí)仍然保持在3 h的水平;cleaved caspase-3表達(dá)量同步增強(qiáng)(P0.05),6 h時(shí)達(dá)高峰。結(jié)論:胞外高濃度ATP能夠誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞自噬和凋亡;自噬增強(qiáng)在前,凋亡高潮在后;隨著ATP作用時(shí)間的延長(zhǎng),凋亡占主導(dǎo)地位。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 腺苷三磷酸 SH-SYY細(xì)胞 自噬 細(xì)胞凋亡
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81271376;No.81371346;No.81100912)
【分類(lèi)號(hào)】：R363.21
【正文快照】： 腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)不僅是體內(nèi)儲(chǔ)能供能物質(zhì),還是細(xì)胞間傳遞信息的重要活性分子,中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)神經(jīng)細(xì)胞釋放的ATP作為遞質(zhì),對(duì)神經(jīng)功能的作用越來(lái)越受到關(guān)注[1]。生理?xiàng)l件下胞外ATP濃度在μmol/L水平,它通過(guò)核苷轉(zhuǎn)運(yùn)形式釋放至

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1 陳亮;辛鐘成;郭應(yīng)祿;;Leydig細(xì)胞睪酮合成功能和自噬調(diào)控[J];中國(guó)男科學(xué)雜志;2007年11期

2 李冬娜;梁幼生;周永華;張煥相;沈海英;駱偉;龔唯;諸葛洪祥;;剛地弓形蟲(chóng)速殖子與鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)觀察[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2010年04期

3 陸立鶴;顏建云;于匯民;劉筱靄;;自噬參與氧化性低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞鈣化[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2010年06期

4 劉慧慧;曹勇軍;張艷林;楊亞萍;劉春風(fēng);;纖維蛋白誘導(dǎo)的自噬促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖與血管腔樣結(jié)構(gòu)形成[J];江蘇醫(yī)藥;2011年16期

5 胡雯,樸英杰;秋水仙素對(duì)大鼠肝細(xì)胞溶酶體自噬作用的超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞化學(xué)觀察[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1989年04期

6 李爾然;張琢;尚俊依;王秋月;康健;;結(jié)核桿菌抗原誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞水通道蛋白1(AQP1)表達(dá)的調(diào)節(jié)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年05期

7 姜茜;許彩民;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞死亡[J];生命的化學(xué);2009年05期

8 金城;;調(diào)控巨噬細(xì)胞自噬水平可降低免疫細(xì)胞的凋亡率[J];微生物學(xué)通報(bào);2010年05期

9 彭心昭,陳英,喬?hào)|坊,張淑春,陳練波,樸英杰;長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)的自噬性凋亡與細(xì)胞內(nèi)游離Ca~(2+)濃度的相關(guān)性研究[J];解剖學(xué)研究;2000年01期

10 何才姑,樸英杰,胡蓮美;受體介導(dǎo)內(nèi)吞和自噬同凋亡的關(guān)系[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年10期

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1 韋雪;漆永梅;張迎梅;;鎘、活性氧自由基與自噬發(fā)生的分子機(jī)制[A];中國(guó)活性氧生物學(xué)效應(yīng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（第一冊(cè)）[C];2011年

2 李康生;代劍平;;病毒感染與細(xì)胞自噬[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 吳淑燕;宋國(guó)蓉;眭陽(yáng);李Z腦

本文編號(hào)：452780