本文關鍵詞：內向整流鉀通道Kir4.1在少突膠質細胞發(fā)育及髓鞘形成中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：少突膠質細胞(Oligodendrocyte,OL)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)的髓鞘形成細胞,對于髓鞘的形成以及神經(jīng)信息的傳遞有著非常重要的作用。少突膠質細胞由少突膠質前體細胞(Oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化而來。長期研究明確地表明,OL發(fā)育異常、脫髓鞘或髓鞘再生障礙參與了CNS多種疾病的形成,其中包括多發(fā)性硬化癥(Multiple sclerosis,MS),視神經(jīng)炎,肌萎縮側索硬化,精神分裂癥,抑郁癥等精神疾病的病理生理過程。有最新研究顯示內向整流鉀離子通道4.1(Inwardly rectifying K channel 4.1,Kir4.1)在MS病人的病灶區(qū)表達異常,Kir4.1通道廣泛分布在各種組織,因為該通道電壓與電流的關系具有內向整流特性而得名。Kir4.1通道對調節(jié)神經(jīng)的興奮性、電解質的平衡和維持正常神經(jīng)功能具有極為重要的作用,但其是否參與髓鞘化異�；蛘呙撍枨始膊∪圆磺宄�。少突膠質細胞由少突膠質前體細胞(Oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化而來。目前關于Kir4.1在OL發(fā)育以及髓鞘形成中的作用還未見報道。目前我們的研究旨在Kir4.1是否參與CNS髓鞘發(fā)育。我們的實驗數(shù)據(jù)顯示,Kir4.1在體外培養(yǎng)的OPC和OL中均有表達,在誘導OPC分化為OL后,Kir4.1表達水平顯著增高。加入Kir4.1特異性阻斷劑地西帕明(Desipramine,DES)發(fā)現(xiàn)細胞中髓鞘相關蛋白(Myelin basic protein,MBP)信號明顯減弱,MBP陽性細胞數(shù)明顯低于對照,證實阻斷Kir4.1功能會導致體外OPC分化受阻。同時,在少突膠質細胞系特異敲除Kir4.1通道的小鼠中發(fā)現(xiàn)胼胝體和視神經(jīng)髓鞘發(fā)育異常,胼胝體OL細胞減少,海馬組織和皮層組織MBP表達量降低。這說明在少突膠質細胞系中敲除Kir4.1會導致OL發(fā)育受阻和CNS髓鞘缺陷。這些結果提示向整流鉀通道kir4.1在ol發(fā)育及髓鞘形成中發(fā)揮重要作用。研究目的:明確內向整流鉀通道kir4.1是否在少突膠質細胞發(fā)育及髓鞘形成中發(fā)揮作用。研究方法:1.利用westernblot和細胞免疫組化檢測opc分化的不同階段,kir4.1及髓鞘相關蛋白mbp的表達情況。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,gapdh)為內參,聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction,pcr)方法檢測kir4.1及mbp的mrna表達。2.利用kir4.1的特異性阻斷劑desipramine在opc分化的不同階段阻斷kir4.1通道96h后,westernblot檢測髓鞘相關蛋白mbp的表達情況。細胞免疫染色方法檢測加入des后,mbp、少突膠質細胞系的標記蛋白olig2(oligodendrocytetranscriptionfactor2)、增殖細胞相關核抗原ki67和血小板源性生長因子α受體(α-receptorforplatelet-derivedgrowthfactor,pdgfrα)的表達情況。3.利用kir4.1f/f小鼠與少突膠質細胞系特異性表達olig1的cre小鼠雜交,構建在少突膠質細胞系中特異敲除kir4.1通道的遺傳修飾小鼠品系olig1-cre。利用依來鉻氰r染色法和電鏡技術檢測視神經(jīng)髓鞘的形態(tài)學變化,利用confocal顯微鏡觀察kir4.1敲除對ol細胞發(fā)育的影響。利用westernblot技術檢測kir4.1敲除小鼠海馬、大腦皮層以及脊髓中mbp的表達狀況。主要結果:1.在體外培養(yǎng)的ol細胞中kir4.1通道蛋白和信使核糖核酸(messengerrna,mrna)的表達量較opc增加,ol細胞中mbp蛋白和mrna的表達量較opc也明顯增加。2.體外培養(yǎng)的opc細胞中加入des后,mbp表達量明顯下降,ki67和pdgfrα表達量明顯增加。3.依來鉻氰R染色和電鏡觀察顯示Kir4.1敲除的小鼠視神經(jīng)髓鞘發(fā)育異常,免疫熒光染色顯示Kir4.1敲除的小鼠中Olig2、成熟少突膠質細胞標記物(adenomatous polyposis coli(APC)tumor suppressor protein,CC-1)表達量下降。Western blot顯示Kir4.1敲除小鼠海馬和大腦皮層中MBP表達量明顯下降,脊髓中MBP表達量無明顯變化。結論:1.內向整流鉀通道Kir4.1在少突膠質細胞發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用;2.阻斷內向整流鉀通道Kir4.1會抑制少突膠質前體細胞的分化;3.內向整流鉀通道Kir4.1的功能異常會影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成。
【關鍵詞】：向整流鉀離子通道4.1 少突膠質細胞 少突膠質細胞前體細胞 髓鞘
【學位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 英文縮寫詞表10-13
• 前言13-18
• 材料與方法18-35
• 實驗結果35-46
• 討論46-49
• 結論49-50
• 參考文獻50-53
• 文獻綜述53-62
• 參考文獻58-62
• 致謝62-63
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文63-65
• 個人簡歷65

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1 何家全,蔡文琴,張可成;少突膠質細胞與神經(jīng)元相互作用時神經(jīng)元細胞內鈣離子濃度的變化[J];第三軍醫(yī)大學學報;2001年07期

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4 王晗知;蔡文琴;肖嵐;;少突膠質細胞發(fā)育分化的轉錄調控[J];生理科學進展;2009年04期

5 姚竹秀;王有琪;;家兔中樞神經(jīng)系統(tǒng)少突膠質細胞的形態(tài)和分布[J];解剖學報;1964年02期

6 何平,沈馨亞,楊勤,汪洋,邱云芳,劉才棟;新生大鼠大腦少突膠質細胞系的分離純化和定向分化培養(yǎng)[J];中國神經(jīng)科學雜志;2001年01期

7 王艷霞;富賽里;陸佩華;;SOX蛋白與少突膠質細胞的發(fā)育[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2006年03期

8 于鈺;索倫;吳強;;PCDHα在髓鞘形成和少突膠質細胞發(fā)育中的作用[J];動物學研究;2012年04期

9 楊光;李翠;楊文靜;張溢凡;肖林;;MicroRNA調控少突膠質細胞分化的研究進展[J];生命科學;2013年03期

10 楊躍;L-和S-型髓磷脂相關糖蛋白(MAG)在成年大鼠前髓帆的少突膠質細胞單位表型中的不同表達[J];中國神經(jīng)科學雜志;1999年03期

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1 符輝;;Tcf7l2對少突膠質細胞發(fā)育的影響[A];中國解剖學會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

2 肖嵐;Devon Ric;Xinmin Li;;喹的平促進少突膠質細胞分化及髓鞘形成的細胞培養(yǎng)研究[A];2007年中國解剖學會第十屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文摘要匯編[C];2007年

3 牛建欽;李濤;陳顯軍;黃南昕;王凌云;吳錫艷;肖嵐;;星型膠質細胞連接蛋白43維持少突膠質細胞前體細胞池的作用研究[A];中國神經(jīng)科學學會第十屆全國學術會議論文摘要集[C];2013年

4 沈學鋒;陳耀明;蔡同建;杜可軍;駱文靜;陳景元;;TOCP通過激活CDK5誘導雞少突膠質細胞損害[A];中國毒理學會第五次全國學術大會論文集[C];2009年

5 付元山;;大鼠少突膠質前體細胞培養(yǎng)的初步研究[A];中國神經(jīng)科學學會第六屆學術會議暨學會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

6 仇玄;陳林;李琛;黃春霞;盧偉;楊姝;趙圓宇;師曉燕;張蕾;唐勇;;長期豐富生存環(huán)境對青年和老年雄性大鼠大腦海馬結構內少突膠質細胞和毛細血管的影響[A];中國解剖學會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

7 梅峰;牛建欽;劉淑寶;肖嵐;;轉錄因子Olig1和Olig2在少突膠質細胞分化調控中作用機制的新的認識[A];中國神經(jīng)科學學會第十屆全國學術會議論文摘要集[C];2013年

8 王凌云;李紅麗;田衍平;汪云;牛建欽;肖嵐;;RyR3介導ER鈣釋放參與少突膠質細胞髓鞘成熟的調控作用研究[A];中國解剖學會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

9 謝利娟;史婧奕;朱建幸;;新生大鼠少突膠質前體細胞的培養(yǎng)和分離純化[A];第六屆江浙滬兒科學術會議暨兒科學基礎與臨床研究進展學術班論文匯編[C];2009年

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本文編號：431997