發(fā)布時間：2025-05-01 08:46

　　 目的探索神經(jīng)限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列與小鼠胚胎干細胞向神經(jīng)細胞誘導分化的關系。方法應用序貫誘導法定向誘導鼠胚胎干細胞分化為神經(jīng)細胞,基因芯片篩選出的11種含NRSE/RE-1序列的神經(jīng)相關基因,實時定量PCR測定其在分化過程中的表達。結(jié)果誘導分化后的胚胎干細胞表達多種成熟神經(jīng)元標志,11種含NRSE/RE-1序列基因隨誘導分化的進程表達量升高。結(jié)論鼠胚胎干細胞可通過序貫誘導分化為神經(jīng)細胞,NRSE/RE-1序列可能是胚胎干細胞向神經(jīng)元誘導分化的主要調(diào)控位點。

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【部分圖文】：

圖4，分化第十天細胞高倍鏡下形態(tài)

一個細長突起，類似多級神經(jīng)元(圖3)。高倍鏡下可見一些突起末端與其他細胞突起接觸，末端膨大，類似突觸樣結(jié)構(gòu);還有的細胞突起末端膨大，類似生長端樣結(jié)構(gòu)(圖4)。圖l，未分化ESCs光鏡圖左圖，生長于飼養(yǎng)層上的ESCs，呈集落樣生長，細胞排列緊密，集落邊界清楚(40x)右圖，堿性磷酸....

圖2，分化第四天細胞低倍鏡下形態(tài)

出現(xiàn)一定的形態(tài)變化，細胞呈多角形從集落向外伸展，第4天起開始出現(xiàn)明顯形態(tài)變化，部分細胞仍聚集成集落，其周圍的細胞逐漸伸出突起，向四周伸展，整個培養(yǎng)中細胞形態(tài)的改變并不同時，并不是所有的細胞形態(tài)都是一致的(圖2);隨后，分化細胞突起逐漸變長、變細，與鄰近分化細胞交織成網(wǎng)狀。中間集落....

圖3，分化第十天細胞低倍鏡下形態(tài)

細胞團增大后隨每次換液逐漸脫落。貼壁分化細胞大多為雙極細胞，胞體圓亮，兩極各有一細長突起。也有小部分分化細胞胞體成多邊形，有多個短突起，僅有一個細長突起，類似多級神經(jīng)元(圖3)。高倍鏡下可見一些突起末端與其他細胞突起接觸，末端膨大，類似突觸樣結(jié)構(gòu);還有的細胞突起末端膨大，類似生長....

圖6，n種基因Real一tirnePCR的檢測結(jié)果

在分化第4天表達最高，隨分化過程表達量逐漸下降，到D10為D4的1/4;成熟神經(jīng)元標志基因NSE的表達隨誘導分化升高，即第10天為最高;其他n種待測基因的表達水平D10與DO相比都有不同程度的增長(見圖6)。進一步分析，通過計算D4、D10時間點與DO的相對增長比率(見圖7)，可....

本文編號：4041991