發(fā)布時間：2017-05-25 19:18

  本文關(guān)鍵詞：降鈣素基因相關(guān)肽促進體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探索降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)對體外培養(yǎng)的新生小鼠室管膜下區(qū)神經(jīng)干細胞增殖和分化的影響。方法:分離新生小鼠室管膜下區(qū)組織,經(jīng)機械法和酶消化法制成單細胞懸液,抗SOX-2和抗Nestin免疫熒光染色,鑒定分離培養(yǎng)的細胞。以未添加b FGF和EGF的無血清培養(yǎng)基誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化。取體外培養(yǎng)至第3代的神經(jīng)干細胞,分為4組,分別為對照組、1n M CGRP組、10n M CGRP組、100n M CGRP組。MTT法尋找體外培養(yǎng)神經(jīng)干細胞最佳的增殖時間,Brd U標(biāo)記法和神經(jīng)球體積測量法來檢測各組之間神經(jīng)干細胞增殖能力的差異。采用免疫細胞化學(xué)染色方法來標(biāo)記神經(jīng)元(Neuronal class IIIβ tubulin,Tuj-1)、星形膠質(zhì)細胞(Glial fibrillary acidic protein,GFAP),并分別統(tǒng)計體外誘導(dǎo)分化培養(yǎng)3天、7天各組之間Tuj-1陽性細胞占總細胞數(shù)的比例,進而比較不同體外培養(yǎng)時間各組之間神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化的能力的強弱。結(jié)果:MTT法提示體外培養(yǎng)4天神經(jīng)干細胞增殖能力最強。體外培養(yǎng)4天時,各組之間的Brd U陽性細胞數(shù)及神經(jīng)球體積無明顯差異。體外誘導(dǎo)分化3天,對照組、1n M CGRP組、10n M CGRP組、100n M CGRP組中Tuj-1的百分比分別為(26.1±5.1)%,(28.1±6.1)%,(34.7±4.8)%及(56.0±5)%,其中100n M CGRP組中Tuj-1的百分比相對于其他3組明顯升高(P0.05);而體外誘導(dǎo)分化7天,對照組、1n M CGRP組、10n M CGRP組、100n M CGRP組中Tuj-1的百分比依次為(45.4±4.2)%,(53.8±4.3)%,(70±2.6)%和(48.8±4.1)%,其中10n M CGRP組中Tuj-1的百分比相對于其他3組明顯升高(P0.05)。結(jié)論:CGRP無明顯促進體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞的增殖作用,但是可以促進體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化,而且這種促分化作用具有濃度及時間依賴性。
【關(guān)鍵詞】：降鈣素基因相關(guān)肽 室管膜下區(qū) 神經(jīng)干細胞 增殖 分化
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R329
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 序言8-11
• 參考文獻9-11
• 1 實驗材料11-14
• 2 實驗方法14-18
• 3 實驗結(jié)果18-23
• 4 討論23-27
• 全文結(jié)論27-28
• 參考文獻28-32
• 綜述32-46
• 參考文獻40-46
• 中英文縮略詞對照46-47
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文47-48
• 致謝48-49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 熊建文;肖化;張鎮(zhèn)西;;MTT法和CCK-8法檢測細胞活性之測試條件比較[J];激光生物學(xué)報;2007年05期

2 葉建亞;李聰慧;唐蔚東;馬常升;郝慶卯;秦永;;巢蛋白及性別決定基因高遷移率組蛋白在SAMP8小鼠穹隆下器的表達及意義[J];解剖學(xué)報;2014年02期

  本文關(guān)鍵詞：降鈣素基因相關(guān)肽促進體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：394755