發(fā)布時(shí)間：2024-04-01 01:09

　　目的構(gòu)建海分枝桿菌感染斑馬魚模型,對(duì)先導(dǎo)化合物的有效性及其代謝衍生物進(jìn)行檢測(cè),以有效降低藥物體內(nèi)篩選的成本。方法采用海分枝桿菌感染斑馬魚成魚,測(cè)定斑馬魚的存活率,用HE以及Ziehl-Neelsen染色的方式,觀察斑馬魚體內(nèi)肉芽腫形成情況,并對(duì)形成的肉芽腫數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù),用于評(píng)價(jià)抗結(jié)核藥物利福平對(duì)斑馬魚成魚結(jié)核病的治療效果,結(jié)合細(xì)菌菌落定量PCR計(jì)算利福平給藥的IC₅₀值。結(jié)果成功構(gòu)建了海分枝桿菌感染斑馬魚的抗結(jié)核藥物篩選模型。利福平可以減少海分枝桿菌感染斑馬魚體內(nèi)的肉芽腫數(shù)目和細(xì)菌數(shù),對(duì)照組肉芽腫數(shù)目平均有28個(gè),200μmol/L利福平給藥組有5.6個(gè),而利福平高劑量組未發(fā)現(xiàn)肉芽腫,兩個(gè)治療組與對(duì)照組相比均有顯著性差異(P <0.05)。利福平成魚給藥的IC₅₀值為52.5μmol/L。結(jié)論海分枝桿菌-斑馬魚感染模型結(jié)合細(xì)菌菌數(shù)定量PCR分析方法是一種簡單、高效的抗結(jié)核藥物體內(nèi)篩選模型,可用于抗結(jié)核藥物的篩選與評(píng)價(jià)。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.3 試劑盒
    1.2 方法
        1.2.1 顯微注射
        1.2.2 利福平的處理方法
        1.2.3 斑馬魚切片染色
        1.2.4 qPCR測(cè)定海分枝桿菌DNA
        1.2.5 IC50的計(jì)算
2 結(jié)果
    2.1 海分枝桿菌感染斑馬魚成魚
    2.2 利福平可以減少海分枝桿菌感染斑馬魚體內(nèi)的肉芽腫數(shù)目和細(xì)菌數(shù)
    2.3 應(yīng)用qPCR計(jì)算利福平成魚給藥的IC50
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