目的：人細小病毒B19(Human Parvovirus B19，以下簡稱B19病毒)是一種可致人類多種疾病的小DNA病毒，主要經(jīng)呼吸道和血液途徑傳播，可引起社區(qū)局部流行。諸多研究表明B19病毒可能與一過性再障危象、傳染性紅斑、急性血小板減少性紫癜及非免疫性胎兒水腫等疾病相關。B19病毒在我國人群中也有較高的感染率，尤其免疫功能低下或缺陷患者可發(fā)生持續(xù)感染和慢性貧血，重者危及生命。B19病毒是由5.6kb核苷酸組成，編碼一個非結(jié)構(gòu)蛋白(NS)和兩個結(jié)構(gòu)蛋白(VP1、VP2)。近年國外研究發(fā)現(xiàn)B19病毒不同地區(qū)流行株之間的基因有明顯變異。B19病毒NS蛋白具有細胞毒性，可誘導靶細胞凋亡，其變異與B19病毒致病力密切相關。國內(nèi)對于B19 第四軍醫(yī)大學碩士學位論文 病毒NS基因變異研究較少。近年來分子克隆技術的發(fā)展突飛猛進， 分子克隆的方法亦多種多樣，特別是PCR技術的應用，使得分于克 隆技術的應用日益...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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英文縮寫詞表
前言
文獻回顧
    一、 B19病毒的發(fā)現(xiàn)及其特征
    二、 B19病毒與人類疾病
    三、 B19病毒的研究方法
    四、 B19病毒基因變異研究
    五、 NS基因及蛋白的研究
材料和方法
    Ⅰ 材料
        一、 研究對象
        二、 病毒來源
        三、 試劑
        四、 主要儀器設備
        五、 幾種有關化學試劑的配制
    Ⅱ 方法
        一、 血標本DNA提取
        二、 PCR反應及結(jié)果觀察
        三、 基因克隆
            （一） PCR產(chǎn)物的純化
            （二） 大腸桿菌JM109的增菌
            （三） 大腸桿菌JM109感受態(tài)的制備
            （四） DNA片段添A反應
            （五） NS基因目的片段與pGEM-T載體的連接
            （六） 重組DNA的轉(zhuǎn)化
            （七） 質(zhì)粒的提取
            （八） 酶切及鑒定
        四、 核苷酸測序
結(jié)果
    一、 PCR擴增HPV B19 NS基因的結(jié)果
    二、 HPV B19 NS測序結(jié)果
    三、 HPV B19 NS-pGEM-T、NSD-pGEM-T重組質(zhì)粒的構(gòu)建
討論
    一、 B19病毒基因變異性及其流行病學意義
    二、 B19病毒基因克隆技術的建立及其應用價值
小結(jié)
致謝
參考文獻
附圖



本文編號：3906753