目的構(gòu)建含有H6N2型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的皰疹口炎病毒(VSV)。方法以H6N2亞型禽流感病毒互補脫氧核糖核酸(cDNA)為模板,擴增HA基因,并與pcDNA3.1+載體連接;使用VSVΔG*-G病毒感染制備VSVΔG*-HA假病毒,并對其血凝活性進行測定。結(jié)果成功構(gòu)建重組表達載體pcDNA3.1HA;HA蛋白表達于293T細胞;熒光顯微鏡證實VSVΔG*-HA假病毒包裝成功;活性試驗顯示VSVΔG*-HA假病毒具有與禽流感病毒相似的血凝活性。結(jié)論含有H6N2型禽流感病毒HA蛋白的VSV假病毒安全、可靠,為進一步對禽流感病毒受體等研究及篩選抗流感病毒的藥物提供了技術(shù)支持和思路。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 PCR擴增及HA基因片段的鑒定
    1.4 重組質(zhì)粒的擴增鑒定
    1.5 假病毒制備
    1.6 Western blot分析
    1.7 假病毒血凝效價的檢測
2 結(jié)果
    2.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    2.2 VSV-ΔG*-HA假病毒基本特征
    2.3 Western blot檢測
    2.4 VSV-ΔG*-HA假病毒的血凝活性
3 討論



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