目的構(gòu)建含有H6N2型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的皰疹口炎病毒(VSV)。方法以H6N2亞型禽流感病毒互補(bǔ)脫氧核糖核酸(cDNA)為模板,擴(kuò)增HA基因,并與pcDNA3.1+載體連接;使用VSVΔG*-G病毒感染制備VSVΔG*-HA假病毒,并對(duì)其血凝活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果成功構(gòu)建重組表達(dá)載體pcDNA3.1HA;HA蛋白表達(dá)于293T細(xì)胞;熒光顯微鏡證實(shí)VSVΔG*-HA假病毒包裝成功;活性試驗(yàn)顯示VSVΔG*-HA假病毒具有與禽流感病毒相似的血凝活性。結(jié)論含有H6N2型禽流感病毒HA蛋白的VSV假病毒安全、可靠,為進(jìn)一步對(duì)禽流感病毒受體等研究及篩選抗流感病毒的藥物提供了技術(shù)支持和思路。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 PCR擴(kuò)增及HA基因片段的鑒定
    1.4 重組質(zhì)粒的擴(kuò)增鑒定
    1.5 假病毒制備
    1.6 Western blot分析
    1.7 假病毒血凝效價(jià)的檢測(cè)
2 結(jié)果
    2.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    2.2 VSV-ΔG*-HA假病毒基本特征
    2.3 Western blot檢測(cè)
    2.4 VSV-ΔG*-HA假病毒的血凝活性
3 討論



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