目的:探討伯氏瘧原蟲(chóng)絲/蘇氨酸磷酸酶6(PPP6)作為傳播阻斷疫苗候選抗原的可行性。方法:PCR擴(kuò)增PPP6蛋白全長(zhǎng)編碼基因并克隆入p ET32a(+)載體。IPTG誘導(dǎo)PPP6重組蛋白的表達(dá),純化后皮下免疫小鼠,收集抗PPP6免疫血清。ELISA和Western blot檢測(cè)抗PPP6免疫血清效價(jià)和特異性。實(shí)驗(yàn)觀察免疫血清對(duì)配子體出絲、動(dòng)合子和囊合子發(fā)育的影響。結(jié)果:成功誘導(dǎo)PPP6重組蛋白表達(dá),抗PPP6免疫血清抗體效價(jià)為1∶3 200;與對(duì)照組相比,抗PPP6免疫血清可顯著抑制配子體出絲(P<0. 000 1);動(dòng)合子數(shù)目和動(dòng)合子轉(zhuǎn)化率分別顯著降低65. 3%和42. 07%(P<0. 000 1);抗PPP6血清1∶5倍稀釋時(shí),囊合子形成數(shù)量減少68. 91%(P<0. 000 1)。結(jié)論:PPP6蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。抗PPP6免疫血清具有明顯的傳播阻斷效果。

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

圖1PPP6重組蛋白表達(dá)檢測(cè)Fig．1ExpressionofrecombinantPPP6protein

動(dòng)合子轉(zhuǎn)化率觀察顯示，1∶5倍稀釋的抗PPP6免疫血清可顯著抑制動(dòng)合子轉(zhuǎn)化率，使動(dòng)合子轉(zhuǎn)化率下降42.07%(P＜0.0001，圖3B)。上述結(jié)果提示抗PPP6免疫血清可體外抑制動(dòng)合子的形成和分化。2.4抗PPP6免疫血清對(duì)囊合子形成數(shù)量的影響采用100μl抗PPP6免疫血清尾靜....

圖2抗PPP6免疫血清對(duì)雄配子體出絲的影響Fig．2Effectofanti-PPP6serumonmalegametocyteex-

數(shù)量。本研究發(fā)現(xiàn)，吸食抗PPP6免疫血清過(guò)繼轉(zhuǎn)移組小鼠血液的按蚊胃內(nèi)囊合子形成顯著減少圖1PPP6重組蛋白表達(dá)檢測(cè)Fig．1ExpressionofrecombinantPPP6proteinNote:A.Thecoomassiebrilliantbluestainingresu....

圖3抗PPP6血清對(duì)動(dòng)合子數(shù)目和形成率的影響Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberand

圖3抗PPP6血清對(duì)動(dòng)合子數(shù)目和形成率的影響Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberandookineteconversionrateNote:A.Theeffectofanti-PPP6serumonookinetenumber.B....

圖4抗PPP6血清對(duì)囊合子形成的抑制作用Fig．4Inhibitoryeffectofanti-PPP6serumonoocystsfor-

圖3抗PPP6血清對(duì)動(dòng)合子數(shù)目和形成率的影響Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberandookineteconversionrateNote:A.Theeffectofanti-PPP6serumonookinetenumber.B....

本文編號(hào)：3899914