發(fā)布時(shí)間：2024-02-05 07:51

　　目的建立基于臨床腫瘤標(biāo)本的胃癌轉(zhuǎn)移模型,為胃癌的轉(zhuǎn)移研究提供個(gè)體化的動(dòng)物模型。方法將胃癌新鮮的手術(shù)標(biāo)本移植到裸鼠皮下,建立胃癌患者異種移植(Patient-derived xenograft,PDX)模型。進(jìn)一步通過手術(shù)將皮下瘤組織原位移植到裸鼠胃部肌層,連續(xù)觀察裸鼠的體征狀態(tài),通過近紅外熒光活體成像技術(shù)檢測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生。解剖荷瘤小鼠,將肺部轉(zhuǎn)移灶進(jìn)一步移植裸鼠皮下獲得實(shí)體瘤。HE染色觀察原發(fā)瘤與轉(zhuǎn)移瘤的結(jié)構(gòu)特征,(short tandem repeat)STR分析原發(fā)瘤和轉(zhuǎn)移瘤的遺傳特性。PCR-Array分析轉(zhuǎn)移瘤和原發(fā)瘤中轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果成功建立胃癌PDX模型,移植瘤組織結(jié)構(gòu)與患者保持基本一致;通過胃部原位移植發(fā)現(xiàn)編號(hào)C19751的小鼠發(fā)生肺和肝的轉(zhuǎn)移。其中肺轉(zhuǎn)移灶皮下移植后獲得了實(shí)體瘤,STR分析顯示原發(fā)瘤保持了與肺轉(zhuǎn)移瘤一致的遺傳特征。PCR-Array結(jié)果顯示,與原發(fā)瘤相比,轉(zhuǎn)移瘤中CXCL12,IGF1和MMP2基因表達(dá)均顯著上調(diào)。結(jié)論利用臨床腫瘤標(biāo)本成功建立胃癌轉(zhuǎn)移模型,為胃癌轉(zhuǎn)移研究提供了良好的個(gè)體化模型。

【文章頁(yè)數(shù)】：11 頁(yè)

【部分圖文】：

圖5PCR-Array分析

RT2ProfilerTMPCRArrayHumanTumorMetastasis試劑盒含有84個(gè)SYBR?Green優(yōu)化的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因引物，并含有相應(yīng)的反應(yīng)體系質(zhì)量控制。實(shí)時(shí)定量PCR(real-timePCR）結(jié)果分析采用ΔΔCt方法。首先計(jì)算每個(gè)處理組中....

圖2PDX模型STR檢測(cè)

STR(shorttandemrepeat）檢測(cè)所選取的16個(gè)位點(diǎn)具有種屬特異性，是從人類的23對(duì)染色體中所挑選的等位基因，多態(tài)性程度高。STR由2～6個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)核心序列，核心序列串聯(lián)重復(fù)排列，序列和重復(fù)次數(shù)決定多態(tài)性[10]。檢測(cè)結(jié)果表明，從人類染色體上選取的16個(gè)位點(diǎn)....

圖3近紅外熒光活體成像及轉(zhuǎn)移灶

將3例臨床胃癌手術(shù)標(biāo)本采用裸鼠皮下移植的方法成功建立了PDX模型，進(jìn)一步原位移植一個(gè)月后，C19751模型組顯著消瘦，注射腫瘤靶向性NIRF染料，活體成像結(jié)果顯示MHI-148染料特異性集聚在腫瘤部位；并同時(shí)在胃部、肝部和肺部出現(xiàn)熒光信號(hào)（圖3A）。解剖小鼠后，肉眼可看到部分小鼠....

圖4肺和肝轉(zhuǎn)移瘤組織結(jié)構(gòu)（H&E染色，×400，標(biāo)尺=20μm)

圖3近紅外熒光活體成像及轉(zhuǎn)移灶2.4胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的分析

本文編號(hào)：3895898