目的:建立人胃癌細(xì)胞MGC-803原位胃癌移植瘤模型,并運(yùn)用可視熒光活體成像技術(shù)探討原位移植瘤分期。方法:將人胃癌MGC-803細(xì)胞株進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,獲得穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的MGC-803-GFP細(xì)胞株,皮下注射細(xì)胞成瘤后,分割成小塊并手術(shù)移植到胃壁內(nèi),建立裸鼠胃癌原位移植瘤模型。動(dòng)態(tài)觀察原位移植瘤術(shù)后裸鼠的一般情況,活體成像技術(shù)下觀察腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,每周分批處死原位移植瘤祼鼠,結(jié)合組織病理學(xué)檢測(cè)確定病理分期,分析術(shù)后時(shí)間、腫瘤熒光面積與病理分期之間的聯(lián)系,擬以原位移植瘤術(shù)后生長(zhǎng)的各個(gè)時(shí)間段,對(duì)腫瘤分期進(jìn)行大致判定。結(jié)果:成功建立了穩(wěn)定表達(dá)GFP的人胃癌細(xì)胞MGC-803原位胃癌移植瘤模型,通過(guò)可視熒光技術(shù)可以活體追蹤觀察腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移過(guò)程,且隨著術(shù)后時(shí)間及熒光面積的增加,腫瘤病理分期越晚,而以術(shù)后3、5周為界,可初步在活體情況下將原位移植腫瘤分為早、中、晚期。結(jié)論:通過(guò)建立胃癌原位移植瘤模型,利用活體熒光技術(shù)可以再現(xiàn)腫瘤的臨床演變過(guò)程,并以移植術(shù)后時(shí)間為節(jié)點(diǎn)可確定腫瘤的大致分期,為進(jìn)一步對(duì)抗腫瘤藥物療效判定研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    1. 動(dòng)物
    2. 試劑與儀器
    3. 細(xì)胞株的培養(yǎng)和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        3.1 細(xì)胞株培養(yǎng)
        3.2 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化、擴(kuò)增
        3.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    4. 單克隆MGC-803-GFP細(xì)胞株的建立
        4.1 細(xì)胞株篩選
        4.2 獲取單克隆MGC-803-GFP細(xì)胞株
    5. 裸鼠胃癌原位MGC-803-GFP移植瘤模型的建立
        5.1 MGC-803-GFP裸鼠皮下移植瘤的建立
        5.2 原位MGC-803-GFP胃癌移植瘤模型的建立
    6. 監(jiān)測(cè)指標(biāo)及腫瘤分期判定
        6.1 原位胃癌移植瘤術(shù)后小鼠活體熒光學(xué)觀察
        6.2 解剖觀察與組織病理學(xué)檢測(cè)
        6.3 小鼠原位移植瘤病理分期及活體狀態(tài)下時(shí)間節(jié)點(diǎn)判定
    7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
    1.經(jīng)轉(zhuǎn)染后的MGC-803細(xì)胞綠色熒光蛋白表達(dá)情況
    2.MGC-803-GFP細(xì)胞熒光值檢測(cè)結(jié)果
    3.裸鼠皮下移植瘤可見(jiàn)光生物成像結(jié)果
    4.裸鼠原位移植后一般情況
    5.原位移植瘤裸鼠可見(jiàn)光生物成像結(jié)果
    6.裸鼠胃癌原位移植瘤熒光定量與腫瘤生長(zhǎng)曲線
    7. 解剖和組織病理學(xué)觀察
    8. 小鼠原位移植瘤病理分期及活體熒光成像判定
討論



本文編號(hào)：3891527