目的利用表位預(yù)測(cè)分析技術(shù)篩選空腸彎曲菌(C. jejuni)黏附蛋白PEB1的B細(xì)胞免疫優(yōu)勢(shì)表位,并評(píng)價(jià)其免疫保護(hù)效果。方法采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重疊肽段。ELISA系統(tǒng)篩選鑒定PEB1的B細(xì)胞免疫優(yōu)勢(shì)表位。采用KLH偶聯(lián)免疫優(yōu)勢(shì)表位肽免疫BALB/c小鼠,ELISA測(cè)定優(yōu)勢(shì)表位肽誘導(dǎo)的IgG抗體效價(jià)。末次免疫后7 d,經(jīng)口灌胃感染C. jejuni 11168,在感染后的28 d,定量檢測(cè)感染攻毒后各組小鼠的空腸組織C. jejuni的定植量以及q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)炎性細(xì)胞因子TNF-α的相對(duì)表達(dá)水平。通過HL-60細(xì)胞調(diào)理吞噬實(shí)驗(yàn)測(cè)定表位肽誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體所介導(dǎo)的調(diào)理吞噬殺傷功能。免疫B細(xì)胞缺失小鼠,感染攻毒后檢測(cè)腸組織C. jejuni的定植量。結(jié)果 PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa均能與PEB1抗血清產(chǎn)生強(qiáng)烈IgG抗體反應(yīng)�？筆EB155-72aa、抗PEB197-114aa和PEB1211-228aa血清均能與重組的PEB1產(chǎn)生較強(qiáng)的抗原抗體反應(yīng)。與CFA/IFA組相比,免疫PEB155-72aa、PEB197-...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 肽段的合成與偶聯(lián)
    1.4 動(dòng)物的免疫
    1.5 抗體檢測(cè)
    1.6 動(dòng)物感染和空腸組織C.jejuni的定植檢測(cè)
    1.7 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng) (q RT-PCR) 檢測(cè)
    1.8 抗體介導(dǎo)的調(diào)理吞噬作用
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 免疫PEB1重組蛋白對(duì)小鼠感染C.jejuni后的空
    2.2 B細(xì)胞免疫優(yōu)勢(shì)表位篩選及鑒定
    2.3 PEB1免疫優(yōu)勢(shì)表位發(fā)揮抗C.jejuni感染的免疫保護(hù)作用
    2.4 PEB1免疫優(yōu)勢(shì)表位介導(dǎo)的調(diào)理吞噬作用
    2.5 PEB1免疫優(yōu)勢(shì)表位介導(dǎo)的免疫保護(hù)依賴B細(xì)胞
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