艱難梭菌毒素A 3`末端重復區(qū)域基因片斷的PCR克隆及其對臨床應用的意義
發(fā)布時間:2023-12-12 19:46
背景/目的:艱難梭菌(Clostridium difficile)是抗生素相關性腹瀉 (AAD)和偽膜性腸炎(PMC)的主要致病因子。此類疾病的發(fā)生與抗生 素的廣泛應用和抗腫瘤的化療密切相關?股鼗蚩鼓[瘤藥物破壞正常 腸道菌群的微生態(tài)平衡,內源性或外源性艱難梭菌產毒株在腸道定植, 釋放毒素A和毒素B,造成腸道粘膜損害及炎癥。AAD的治療包括停用 抗生素及補液,稍重者可口服甲硝唑,而嚴重感染如偽膜性腸炎需服用 萬古霉素治療。但由于此種疾病較高的復發(fā)率(大于25%)以及逐漸增 多的發(fā)病率和致死率,進行免疫防治和基因疫苗治療的研究十分必要。 另外對于該菌感染,現檢測手段廢時費力,而基因探針診斷的優(yōu)點顯而 易見。該菌產生的毒素A既是腸毒素,又是一種細胞毒素,而毒素B是 在毒素A損傷粘膜細胞的基礎上產生作用,因此毒素A成為研究重點。 編碼毒素A的基因由八千多個堿基構成,在其近3’端有大量的重復單位, 已證明為功能區(qū)域(編碼粘合蛋白)。本實驗的目的在于從毒素A的功能 區(qū)域進行基因片斷的克隆并序列分析以作為進一步治療研究的基礎以及 探討其臨床快速檢測的意義。 方法:(1)、收集臨床腹瀉病人...
【文章頁數】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 艱難梭菌的分離培養(yǎng)和生物學特性
引言
材料和方法
結果
一、 培養(yǎng)和涂片鏡檢
二、 細菌的生化鑒定
三、 傳代、保種和復蘇
討 論
第二部分 毒素A基因3'末端重復區(qū)域基因片斷的克隆
引言
材料和方法
結果
一、 PCR擴增產物的電泳分析
二、 基因片斷測序及序列分析
三、 蛋白質二級結構的預測和分析
討 論
總 結
參考文獻
文獻綜述
致 謝
本文編號:3873527
【文章頁數】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 艱難梭菌的分離培養(yǎng)和生物學特性
引言
材料和方法
結果
一、 培養(yǎng)和涂片鏡檢
二、 細菌的生化鑒定
三、 傳代、保種和復蘇
討 論
第二部分 毒素A基因3'末端重復區(qū)域基因片斷的克隆
引言
材料和方法
結果
一、 PCR擴增產物的電泳分析
二、 基因片斷測序及序列分析
三、 蛋白質二級結構的預測和分析
討 論
總 結
參考文獻
文獻綜述
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本文編號:3873527
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