目的建立適合細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)原頭蚴在體外形成棘球蚴的培養(yǎng)體系。方法以RPMI1640或DMEM培養(yǎng)基為基質(zhì),胎牛血清或綿羊血清為營(yíng)養(yǎng)成分,人肝細(xì)胞株L02為飼養(yǎng)細(xì)胞設(shè)計(jì)配伍2大類、6個(gè)組培養(yǎng)體系;培養(yǎng)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)原頭蚴45 d,根據(jù)各組原頭蚴的頭節(jié)外翻率、成囊率和囊泡大小情況,尋找適合原頭蚴形成棘球蚴的體外培養(yǎng)體系最佳配伍;在最佳配伍的培養(yǎng)體系繼續(xù)培養(yǎng)棘球蚴囊泡至180 d。結(jié)果在起初的45 d期間,DMEM體系的E組(DMEM+胎牛血清+人肝細(xì)胞株L02)培養(yǎng)的棘球蚴生長(zhǎng)最快,20 d起原頭蚴成囊率高于其他各組(P<0.05),25 d起棘球蚴囊泡大于其他各組(P<0.05),45 d時(shí)原頭蚴成囊率達(dá)到100%;在其后的46～180 d內(nèi),棘球蚴囊泡持續(xù)增大,至80 d時(shí)肉眼可見(jiàn)透明囊泡,至180 d時(shí)最大囊泡直徑達(dá)2.2 mm。結(jié)論添加胎牛血清及人肝細(xì)胞株L02的DMEM培養(yǎng)基有利于體外培養(yǎng)的原頭蚴發(fā)育為棘球蚴囊泡。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        1.1.2 主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 細(xì)胞系及培養(yǎng)條件
            1.2.1.1 正常人肝細(xì)胞株L02的復(fù)蘇
            1.2.1.2 正常人肝細(xì)胞株L02的傳代
        1.2.2 配置不同體系的培養(yǎng)基
        1.2.3 原頭蚴的收集與處理
        1.2.4 原頭蚴的單相培養(yǎng)
        1.2.5 觀察原頭蚴狀況
        1.2.6 觀察在優(yōu)化的培養(yǎng)體系中棘球蚴成囊狀況
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同培養(yǎng)體系中各時(shí)間點(diǎn)原頭蚴形態(tài)學(xué)觀察
        2.1.1 培養(yǎng)45d的原頭蚴形態(tài)學(xué)觀察
        2.1.2 45～180 d的原頭蚴形態(tài)變化
    2.2 各培養(yǎng)組的原頭蚴成囊率
    2.3 各培養(yǎng)組的棘球蚴囊泡大小比較
    2.4 各培養(yǎng)組的原頭蚴頭節(jié)外翻率
    2.5 DMEM+胎牛血清+肝細(xì)胞株L02組原頭蚴囊大小生長(zhǎng)曲線
3 討論



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