目的建立重組人白細(xì)胞介素-12(recombinant human IL-12,rhIL-12)的病毒去除/滅活工藝,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法采用預(yù)過(guò)濾器(Viresolve Shield,納米濾膜3.1 cm2)和除細(xì)小病毒過(guò)濾器(Viresolve Pro,納米濾膜3.1 cm2)串聯(lián)過(guò)濾,樣品體積為90 ml,過(guò)濾時(shí)間為2 h,安全系數(shù)為1.88,壓力為30 psi,建立rhIL-12病毒去除工藝,分析該工藝對(duì)產(chǎn)品的比活性及回收率的影響,并以豬細(xì)小病毒(porcine parvovirus,PPV)作為指示病毒,對(duì)該工藝進(jìn)行病毒去除效果驗(yàn)證;采用低pH孵放法(用1 mol/L HCl調(diào)pH值至3.8±0.1,室溫放置180 min后,用1 mol/L NaOH調(diào)pH值至7.4)建立rhIL-12病毒滅活工藝,分析該工藝對(duì)產(chǎn)品的蛋白含量及比活性的影響,并分別以水皰性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)和偽狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)作為指示病毒,對(duì)該工藝進(jìn)行病毒滅活效果驗(yàn)證。結(jié)果納米膜串聯(lián)過(guò)濾病毒去除工藝中,蛋白回收率為95...

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病毒及細(xì)胞
    1.2 rh IL-12
    1.3 主要儀器
    1.4 膜過(guò)濾病毒去除工藝的建立及驗(yàn)證
        1.4.1 膜過(guò)濾去除病毒工藝的建立
        1.4.2膜過(guò)濾去除病毒工藝對(duì)rh IL-12的比活性及回收率影響的檢測(cè)
        1.4.3 膜過(guò)濾去除病毒工藝效果的驗(yàn)證
            1.4.3. 1 病毒滴定
            1.4.3. 2 病毒去除效果驗(yàn)證
    1.5 低p H孵放法病毒滅活工藝的建立及驗(yàn)證
        1.5.1 低p H孵放法病毒滅活工藝的建立
        1.5.2 低p H孵放法病毒滅活工藝對(duì)rh IL-12的蛋白含量及比活性影響的檢測(cè)
        1.5.3 低p H孵放法病毒滅活工藝的效果驗(yàn)證
            1.5.3. 1 病毒滴定
            1.5.3. 2 病毒滅活效果驗(yàn)證
2 結(jié)果
    2.1 rh IL-12病毒去除工藝的建立及驗(yàn)證
        2.1.1 膜過(guò)濾去除病毒工藝對(duì)rh IL-12的比活性率收率的影響
        2.1.2 膜過(guò)濾去除病毒工藝效果的驗(yàn)證結(jié)果
    2.2 rh IL-12病毒滅活工藝的建立及驗(yàn)證
        2.2.1 低p H值對(duì)rh IL-12生物活性和蛋白含量的影響
        2.2.2 低p H孵放法病毒滅活工藝效果的驗(yàn)證結(jié)果
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