卡波濟(jì)肉瘤相關(guān)皰疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是近年來在卡波濟(jì)肉瘤(Kaposi’s sarcoma,KS)組織中發(fā)現(xiàn)的一種γ2型皰疹病毒，并且已成為HIV-1感染陽性患者較常出現(xiàn)的一種腫瘤。本研究的目的是對KSHV的六個潛伏與增殖相關(guān)基因進(jìn)行克隆表達(dá)和表達(dá)產(chǎn)物的多克隆抗體制備與鑒定。 1．相關(guān)基因的克隆及測序鑒定 根據(jù)KSHV基因序列組成，設(shè)計六對引物并引入酶切位點(diǎn)，用PCR方法擴(kuò)增六個目的基因，分別是ORF73C、K8.1、ORF65、ORF26、ORF73N和ORF59。將目的基因克隆至原核表達(dá)質(zhì)粒，構(gòu)建成六個重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒的核酸序列分析結(jié)果顯示，克隆的目的基因ORF73C、K8.1、ORF65、ORF26、ORF73N和ORF59與GenBank中登記的基因序列同源性分別是99％、100％、100％、98％、98％和99％。 2．目的基因的原核表達(dá)與表達(dá)產(chǎn)物的多抗制備 將其中五個重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL₂₁(DE₃)和BL

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 KSHV潛伏與增殖相關(guān)基因的克隆和測序鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    分析和討論
    附圖
第二部分 KSHV相關(guān)目的基因的原核表達(dá)與表達(dá)產(chǎn)物的多克隆抗體制備及鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    分析和討論
第三部分 KSHV潛伏感染ELISA檢測方法的初步建立
    材料與方法
    結(jié)果
    分析討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述及參考文獻(xiàn)



本文編號：3809618