目的 1．基因工程[Gly¹¹]-Humanin原核表達體系的構建、表達及初步純化 2．基因工程人胰島素突變體原核表達體系的構建、表達、初步純化及測活 方法 采用基因工程手段，基因合成法分別獲得[Gly¹¹]-Humanin(HNG)及人胰島素突變體(M-insulin)的cDNA序列，構建了pBV220-HNG、pTXB1-HNG及pTXB1—M-insulin原核表達質粒，基因測序確定質粒的正確性。 三個質粒轉化大腸桿菌工程菌株，誘導表達，Western-Blot鑒定目的蛋白。 采用超聲加洗滌液破碎菌體；離心加凍融分離純化融合蛋白，研究不同的超聲次數(shù)和凍融對包涵體洗滌效果的影響。 放免法測定人胰島素突變體融合蛋白的活性。 結果 1．克隆構建 成功構建了pBV220—HNG、pTXB1—HNG及pTXB1—M-insulin三個質粒，基因測序顯示重組質粒的大小、方向、長度均正確。pBV220—HNG在大腸桿菌中未檢測到表達，后兩個克隆在大腸桿菌BL21(DE3)...

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【學位級別】：碩士

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英文摘要
第一部分 [Gly¹⁴]-Humanin原核表達克隆的構建、表達及初步純化
    引言
    一、 [Gly¹⁴]-Humanin基因序列的設計
    二、 [Gly¹⁴]-Humanin原核表達克隆的構建(單拷貝表達方式)
    三、 [Gly¹⁴]-Humanin原核表達載體的構建、表達及純化(融合表達)
第二部分 人胰島素突變體原核表達克隆的構建、表達、純化及活性測定
    引言
    一、 人胰島素突變體基因序列的設計
    二、 人胰島素突變體原核表達克隆的構建、表達、純化及活性測定(融合蛋白表達方式)
第三部分 結論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝



本文編號：3806005