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真核表達(dá)載體pcDNA3.0-Cx43的構(gòu)建及其在MSC中的表達(dá)

發(fā)布時間:2023-04-25 04:36
  由于壞死或者凋亡而導(dǎo)致的功能性心肌細(xì)胞的減少是急性心肌梗塞及心臟衰竭的一個共同特征。但成體心肌細(xì)胞自身的再生能力相當(dāng)弱,因此采用心肌細(xì)胞移植術(shù)以代替不可逆性心肌細(xì)胞的丟失有望成為受損的心肌再生修復(fù)的另一種有效途徑。目前為止,用于心肌細(xì)胞替代治療的種子細(xì)胞種類較多,包括胎兒心肌細(xì)胞,成肌細(xì)胞,胚胎性和成體干細(xì)胞;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞所具有的多能分化特性以及易獲取、無需免疫抑制治療等優(yōu)點而為心肌細(xì)胞再生的研究提供了新策略。移植細(xì)胞要發(fā)揮功能必須能與周圍正常心肌細(xì)胞在解剖結(jié)構(gòu)上發(fā)生整合以達(dá)到同步收縮。間隙連接是心肌細(xì)胞間溝通的主要結(jié)構(gòu),在心室肌中connexin43為主要的連接蛋白,在細(xì)胞間通訊過程中發(fā)揮重要作用。 本研究通過構(gòu)建攜帶間隙連接蛋白connexin43 cDNA的真核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,觀察間隙連接蛋白connexin43在骨髓基質(zhì)干細(xì)胞中的過量表達(dá)。 方法:1)目的基因connexin43 cDNA在大腸桿菌中擴(kuò)增后連入真核表達(dá)載體pcDNA3.0,構(gòu)建載體pcDNA3.0-Cx43;2)體外分離、培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察其生物學(xué)特性;3)脂質(zhì)...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
正文
    1 真核表達(dá)載體pcDNA3.0-Cx43的構(gòu)建
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
    2 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的體外分離和培養(yǎng)
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
    3 MSC的轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)化細(xì)胞中connexm 43蛋白的表達(dá)
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號:3800716

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