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順序性應(yīng)用生長因子對軟骨細(xì)胞的作用

發(fā)布時間:2023-04-23 06:30
  前言 組織工程構(gòu)建關(guān)節(jié)軟骨已經(jīng)成為關(guān)節(jié)骨科研究的熱點,然而軟骨組織工程過程尚需進(jìn)一步完善。本實驗采用體外培養(yǎng)人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,然后以bFGF及IGF-1對其處理,研究他們對人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的作用以及明確二者之間的相互作用關(guān)系。 材料與方法 1.軟骨細(xì)胞的原代培養(yǎng) 取材:本實驗所用軟骨均取自中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科手術(shù)的正常成人關(guān)節(jié)軟骨。無菌條件下獲取關(guān)節(jié)表面的關(guān)節(jié)軟骨,PBS緩沖液沖洗干凈后放入盛有DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,用眼科剪刀及銳刀將軟骨切成1mm3的碎塊。 原代培養(yǎng):碎軟骨塊中加入0.25%胰蛋白酶,37℃消化20min,再以DMEM液終止消化。加入0.02%Ⅱ型膠原酶消化后,以200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾。將過濾后的細(xì)胞懸液以1500rpm離心5min,去上清,加入DMEM培養(yǎng)基重懸,重復(fù)3次。細(xì)胞計數(shù)并檢查細(xì)胞活力,按105個細(xì)胞/ml密度接種到培養(yǎng)瓶,37℃混合氣體(體積分?jǐn)?shù)分別為5%CO2和95%O2)及飽和濕度條件下培養(yǎng),細(xì)胞貼壁后每隔3~4d更...

【文章頁數(shù)】:39 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文縮略語
四、 論文主體
    1 前言
    2 實驗材料與方法
    3 實驗結(jié)果
    4 論文圖片
    5 討論
    6 結(jié)論
五、 本研究新見解
六、 參考文獻(xiàn)
七、 致謝
八、 綜述
九、 個人簡介
十、 在學(xué)期間發(fā)表論文、獲獎等題目



本文編號:3799286

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