發(fā)布時(shí)間：2017-05-19 18:04

  本文關(guān)鍵詞：鈣化性納米微粒致腎結(jié)石大鼠模型的建立及其致腎結(jié)石機(jī)制的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:利用鈣化性納米微粒(calcifying nanoparticles,CNPs)建立腎結(jié)石大鼠模型;通過(guò)在建模過(guò)程的不同時(shí)間段檢測(cè)大鼠尿液中的中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)、骨橋蛋白(OPN)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)的含量,初步分析CNPs致大鼠腎結(jié)石的形成機(jī)制,為臨床腎結(jié)石患者的治療和預(yù)防復(fù)發(fā)提供新的思路。方法:利用腎結(jié)石患者PCNL術(shù)中所得結(jié)石培養(yǎng)出的CNPs,制成CNPs混懸液。40只SD雄性大鼠隨機(jī)分為4組:CNPs誘石組(A1、A2、A3組)、空白對(duì)照組(B組)。CNPs混懸液通過(guò)鼠尾靜脈注射感染A組大鼠,B組大鼠經(jīng)鼠尾靜脈同時(shí)注射等量0.9%生理鹽水。分別于注射后4小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、1周、2周及8周用代謝籠收集大鼠尿液,用ELISA方法檢測(cè)各時(shí)間段大鼠尿液中的中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白、骨橋蛋白及單核細(xì)胞趨化蛋白-1的含量。分別于注射后1周、2周、8周分批次處死大鼠,腎臟組織Von Kossa染色加核固紅復(fù)染后于光鏡下鑒定造模是否成功,腎臟組織HE染色后于光鏡下觀察其結(jié)晶形成情況及病理改變,對(duì)照分析結(jié)晶的形成情況與大鼠尿液中NGAL、OPN、MCP-1的含量變化間的關(guān)系。結(jié)果:大鼠腎臟組織經(jīng)過(guò)Von Kossa染色加核固紅復(fù)染后在光鏡下觀察:注射后第8周時(shí)A組腎臟組織內(nèi)可見(jiàn)散在不規(guī)則分布的黑褐色或者棕褐色鈣鹽晶體,主要分布于近曲小管和遠(yuǎn)曲小管;b組大鼠腎臟組織內(nèi)未見(jiàn)明顯鈣鹽結(jié)晶,故鑒定cnps致腎結(jié)石大鼠模型建立成功。在注射后4小時(shí),a組的ngal水平(1913.46?223.23ng/l)與b組的ngal水平(1583.54?57.49ng/l)比較即開(kāi)始增高(p0.05),而a組的opn(18.99?2.22μg/l)、mcp-1(457.70?3.50ng/l)水平相比于b組的opn(15.59?2.30μg/l)、mcp-1(437.07?6.82ng/l)水平則無(wú)明顯差異(p0.05);在注射后第2周,a組的opn(28.00?2.69μg/l)、mcp-1(573.78?50.22ng/l)水平相比于b組的opn(16.40?1.54μg/l)、mcp-1(525.92?29.95ng/l)水平開(kāi)始出現(xiàn)大幅度升高(p0.05);在注射后第8周,a組的ngal(3978.85?810.81ng/l)、opn(33.35?10.93μg/l)、mcp-1(734.07?201.47ng/l)含量相比于b組的ngal(1642.58?109.75ng/l)、opn(18.56?2.93μg/l)、mcp-1(534.81?51.14ng/l)含量均顯著增高(p0.05)。與注射cnps后4小時(shí)大鼠尿液中ngal水平相比,a組中ngal水平變化隨著時(shí)間的增加呈上升趨勢(shì)(p0.05);與注射cnps后4小時(shí)大鼠尿液中opn、mcp-1水平相比,2周前a組大鼠尿中opn、mcp-1水平呈緩慢升高狀態(tài),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),2周后a組大鼠尿液中opn、mcp-1水平開(kāi)始大幅度增高,8周時(shí)a組大鼠尿液中opn、mcp-1水平增至最高(p0.05)。大鼠腎臟經(jīng)he染色后置于光鏡下觀察:注射后第1周,a組大鼠腎臟組織可見(jiàn)少量腎小管上皮細(xì)胞顆粒樣變性,腎小管內(nèi)未見(jiàn)鈣鹽晶體沉積;注射后第2周時(shí),a組大鼠腎小管內(nèi)可見(jiàn)少量鈣鹽晶體沉積,伴有少數(shù)腎小管上皮細(xì)胞顆粒樣變性和空泡樣變性;注射后第8周時(shí),A組腎小管內(nèi)可見(jiàn)大量鈣鹽晶體沉積,伴有廣泛腎小管上皮細(xì)胞空泡樣變性;B組腎臟組織未見(jiàn)鈣鹽沉積和病理改變。注射CNPs1周后,隨著腎小管上皮細(xì)胞損傷的加重,A組大鼠尿液中NGAL水平也不斷升高,同時(shí)腎小管內(nèi)鈣鹽晶體的沉積量也隨腎小管上皮細(xì)胞損傷的加重而增多;注射CNPs2周后A組大鼠尿液中的NGAL、OPN、MCP-1含量均隨著腎小管內(nèi)鈣鹽晶體的沉積量增加而不同程度地升高。結(jié)論:CNPs感染大鼠后可以誘導(dǎo)大鼠腎臟內(nèi)鈣鹽晶體的生成和聚集,最終導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生腎結(jié)石;CNPs在感染大鼠4小時(shí)后即開(kāi)始損傷腎小管上皮細(xì)胞;2周后腎小管內(nèi)開(kāi)始出現(xiàn)鈣鹽晶體的粘附和聚集,OPN參與其粘附和聚集過(guò)程,并且鈣鹽晶體的沉積量隨損傷程度的加重也相應(yīng)增加,不斷增多的鈣鹽晶體能刺激大鼠腎臟組織表達(dá)更多的MCP-1。
【關(guān)鍵詞】：腎結(jié)石 鈣化性納米微粒 中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 骨橋蛋白 單核細(xì)胞趨化蛋白-1
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R-332;R692.4
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-24
• 討論24-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-42
• 英漢縮略詞對(duì)照表42-43
• 致謝43-44
• 綜述 鈣化性納米微粒及其與腎結(jié)石相關(guān)的研究進(jìn)展44-64
• 參考文獻(xiàn)55-64

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本文編號(hào)：379393