白血病細(xì)胞系來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)、鑒定及凍存方法的研究
發(fā)布時(shí)間:2023-04-17 04:34
目的 誘導(dǎo)K562細(xì)胞系向樹(shù)突狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化,尋找一種快速、簡(jiǎn)便、高效的獲取DC方法。 方法 1.分組 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的K562細(xì)胞,以5×105/ml的濃度接種至24孔板中,并于實(shí)驗(yàn)組中分別加入①A23187使終濃度為250ng/ml ②A23187 180ng/ml和rhGM-CSF500U/ml ③rhGM-CSF1000U/ml、rhIL-4500U/ml及rhTNF-α 200U/ml,37℃飽和濕度,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天左右,隔天半量換液并給實(shí)驗(yàn)孔補(bǔ)加半量誘導(dǎo)因子。2.形態(tài)學(xué)觀察 通過(guò)倒置顯微鏡觀察誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的動(dòng)態(tài)變化并攝像。3.DC表型鑒定 運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)誘導(dǎo)K562-DC表面分子CD1a、HLA-DR、CD54、CD83、CD80及CD86表達(dá)率,以了解誘導(dǎo)前后及不同方法誘導(dǎo)K562表面分子的差異。4.功能檢測(cè)MTT法檢測(cè)DC對(duì)異基因淋巴細(xì)胞的刺激增殖能力及其致敏T細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用。 結(jié)果 上述三種因子組合均能誘導(dǎo)K562細(xì)胞系向成熟DC轉(zhuǎn)化,且含A23187的兩組72小時(shí)獲得DC樣細(xì)胞的數(shù)量明顯多于不含A23187的...
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
第一章 A23187快速誘導(dǎo)K562細(xì)胞分化成樹(shù)突狀細(xì)胞的研究
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二章 白血病細(xì)胞來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞低溫凍存方法的研究
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3792579
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
第一章 A23187快速誘導(dǎo)K562細(xì)胞分化成樹(shù)突狀細(xì)胞的研究
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二章 白血病細(xì)胞來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞低溫凍存方法的研究
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材料與方法
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本文編號(hào):3792579
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