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間斷壓力對(duì)體外培養(yǎng)成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2023-03-06 18:23
  目的:骨組織工程目前尚未能廣泛地應(yīng)用于臨床,主要原因是各項(xiàng)研究?jī)?nèi)容實(shí)驗(yàn)依據(jù)尚不充分,大多停留在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段。本實(shí)驗(yàn)借鑒前人的研究成果,取成人的骨髓液分離純化得骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),并對(duì)細(xì)胞施加間斷氣體壓力,觀察細(xì)胞在加壓后的增殖及分化情況,以獲得更多種子細(xì)胞,為骨組織工程學(xué)研究?jī)?nèi)容提供更多實(shí)驗(yàn)室依據(jù),從而促進(jìn)骨組織工程應(yīng)用于臨床。 材料與方法:取無(wú)骨髓疾病患者骨髓經(jīng)分離純化后得骨髓基質(zhì)細(xì)胞,將細(xì)胞分為細(xì)胞檢測(cè)組和原代壓力實(shí)驗(yàn)和傳代壓力實(shí)驗(yàn)組。(1)細(xì)胞檢測(cè)組:細(xì)胞接種于6孔板,用含有誘導(dǎo)因子的培養(yǎng)液培養(yǎng)。通過(guò)倒置顯微鏡和HE染色觀察細(xì)胞大體形態(tài);通過(guò)掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);通過(guò)堿性磷酸酶染色、鈣結(jié)節(jié)染色對(duì)細(xì)胞定性。另設(shè)對(duì)照組不加誘導(dǎo)因子,其余條件與實(shí)驗(yàn)組相同。(2)原代壓力實(shí)驗(yàn)組:將細(xì)胞接種于96孔板內(nèi),在原代培養(yǎng)72Hour時(shí)將培養(yǎng)板以封口膜封閉后置于壓力裝置內(nèi),每天施加壓力8小時(shí),壓力大小為0.098Mpa,按照加壓15分鐘→放壓15分鐘→加壓15分鐘的順序,連續(xù)9天。另設(shè)對(duì)照組不加壓力,其余培養(yǎng)條件與實(shí)驗(yàn)組相同。分別在加壓的第3、6、9天進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和AL...

【文章頁(yè)數(shù)】:40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
一、 間斷壓力對(duì)體外培養(yǎng)成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的作用研究
    1 、 中文摘要
    2 、 英文摘要
    3 、 前言
    4 、 材料與方法
    5 、 結(jié)果與分析
    6 、 討論
    7 、 結(jié)論
    8 、 創(chuàng)新點(diǎn)
    9 、 展望
    10 、 參考文獻(xiàn)
二、 綜述
    1 、 正文
    2 、 參考文獻(xiàn)
三、 致謝



本文編號(hào):3757155

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