目的鑒定杜氏利什曼原蟲無鞭毛體特異表達(dá)抗原。方法培養(yǎng)杜氏利什曼原蟲前鞭毛體并體外轉(zhuǎn)化無鞭毛體,其總蛋白經(jīng)2-DE電泳后以小鼠抗杜氏利什曼原蟲無鞭毛體血清進(jìn)行Western blot,對(duì)前鞭毛體與無鞭毛體特異表達(dá)抗原蛋白進(jìn)行MALDI-TOF/TOF串聯(lián)質(zhì)譜鑒定。重組表達(dá)無鞭毛體特異表達(dá)抗原編碼基因,以Western blot法對(duì)重組蛋白進(jìn)行鑒定。結(jié)果等量的杜氏利什曼原蟲前鞭毛體與無鞭毛體蛋白經(jīng)2-DE電泳均可呈現(xiàn)680⁷42個(gè)蛋白點(diǎn),Western blot及MALDI-TOF/TOF-MS分析甘油醛3-磷酸脫氫酶與延伸因子2為杜氏利什曼原蟲前鞭毛體特異表達(dá)抗原,核苷二磷酸激酶為無鞭毛體特異表達(dá)抗原。重組核苷二磷酸激酶編碼基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)Western blot證實(shí)為杜氏利什曼原蟲無鞭毛體特異表達(dá)強(qiáng)抗原。結(jié)論杜氏利什曼原蟲前鞭毛體與無鞭毛體抗原表達(dá)存在差異,核苷二磷酸激酶為杜氏利什曼原蟲無鞭毛體特異表達(dá)強(qiáng)抗原。

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【文章目錄】：
材料與方法
    1材料
    2方法
    3 rNDPK的抗原性鑒定
結(jié)果
    1抗血清效價(jià)
    2杜氏利什曼原蟲總蛋白的2-DE電泳
    3杜氏利什曼原蟲前鞭毛體與無鞭毛體差異表達(dá)抗原的質(zhì)譜鑒定
    4杜氏利什曼原蟲NDPK的表達(dá)與純化
    5 rNDPK的抗原性鑒定
討論



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