本實驗的目的是選擇適合修飾人紅細(xì)胞Rh血型的甲氧基聚乙二醇衍生物，將RhD（+）血型改造為RhD（-）血型，為解決臨床上RhD（-）血源嚴(yán)重缺乏打下基礎(chǔ)。 實驗比較了四種不同端基的甲氧基聚乙二醇（mPEG）對RhD（+）血型抗原的修飾效果；觀察了mPEG修飾對紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能及形態(tài)的影響；建立了雙水相分離系統(tǒng)將修飾與未修飾的紅細(xì)胞分開并判定修飾的比例；觀察了修飾后紅細(xì)胞4℃下保存期；分析了mPEG與紅細(xì)胞膜的結(jié)合穩(wěn)定性；并使用mPEG修飾小鼠紅細(xì)胞，進(jìn)行小動物輸血實驗，觀察了mPEG修飾對紅細(xì)胞在受試動物體內(nèi)壽命的影響。 實驗結(jié)果表明在四種mPEG中，以mPEG-BTC的修飾效果最好，在溫和、接近于生理的條件下可以將RhD（+）抗原充分遮蔽，表現(xiàn)出RhD（-）紅細(xì)胞的性質(zhì)；mPEG修飾沒有影響紅細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能，包括滲透脆性、自身溶血、乙酰膽堿酯酶活性、膜膽固醇含量、ATP、2，3-DPG、紅細(xì)胞變形性以及紅細(xì)胞形態(tài)等；mPEG修飾紅細(xì)胞的比例可達(dá)80％以上；修飾后紅細(xì)胞4℃下可保存21天；保存期內(nèi)mPEG與紅細(xì)胞膜穩(wěn)定結(jié)合；小鼠的體內(nèi)實... 

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
第一章 四種攜帶不同端基的甲氧基聚乙二醇對RhD(+)血型抗原修飾效果的比較
    1.1 實驗材料與儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 mPEG修飾紅細(xì)胞
        1.2.2 mPEG修飾對紅細(xì)胞RhD抗原性的影響
        1.2.3 血小板聚集儀檢測RhD抗原與D抗體凝集程度
    1.3 實驗結(jié)果
    1.4 討論
第二章 mPEG-BTC修飾對RhD(+)紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能的影響
    2.1 實驗材料與儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 自身溶血性檢測
        2.2.2 滲透脆性檢測
        2.2.3 乙酰膽堿酯酶活性檢測
        2.2.4 膽固醇含量檢測
        2.2.5 ATP含量檢測
        2.2.6 2,3-DPG含量檢測
        2.2.7 變形性檢測
        2.2.8 形態(tài)檢測
    2.3 實驗結(jié)果
    2.4 討論
第三章 mPEG-BTC修飾RhD(+)紅細(xì)胞的比例
    3.1 實驗材料與儀器
    3.2 實驗方法
    3.3 實驗結(jié)果
    3.4 討論
第四章 mPEG-BTC修飾RhD(+)紅細(xì)胞的保存
    4.1 實驗材料與儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 滲透脆性檢測
        4.2.2 自身溶血性檢測
        4.2.3 乙酰膽堿酯酶活性檢測
        4.2.4 變形性檢測
        4.2.5 形態(tài)檢測
        4.2.6 ATP含量檢測
    4.3 實驗結(jié)果
    4.4 討論
第五章 mPEG-BTC與紅細(xì)胞膜的結(jié)合穩(wěn)定性
    5.1 實驗材料與方法
    5.2 實驗方法
        5.2.1 凹形血型鑒定卡檢測
        5.2.2 間接抗人球蛋白法檢測
        5.2.3 雙水相系統(tǒng)檢測
        5.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測
    5.3 實驗結(jié)果
    5.4 討論
第六章 mPEG-BTC修飾的RhD(+)紅細(xì)胞在小鼠體內(nèi)存活
    6.1 實驗材料與儀器
    6.2 實驗方法
    6.3 實驗結(jié)果
    6.4 討論
第七章 mPEG-BTC修飾RhD(+)紅細(xì)胞在解決疑難輸血問題上的初步研究
    7.1 實驗材料與儀器
    7.2 實驗方法
        7.2.1 抗體篩查
        7.2.2 RBC樣品制備
        7.2.3 mPEG-BTC修飾紅細(xì)胞
        7.2.4 聚凝胺法檢測
        7.2.5 間接抗人球蛋白法檢測
    7.3 實驗結(jié)果
    7.4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
Rh血型系統(tǒng)
附錄: 已發(fā)表的相關(guān)論文



本文編號：3715689