媒介昆蟲對殺蟲劑的抗性是蟲媒病控制中一個(gè)亟待解決的突出問題。研究表明，抗性產(chǎn)生是由基因決定的。本實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用SSH結(jié)合cDNA芯片鑒定出NYD-Ch和NYD-Tr基因在淡色庫蚊溴氰菊酯抗性品系中差異性高表達(dá)。 本研究根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室獲得的全長NYD-Ch和NYD-Tr基因序列，運(yùn)用PCR方法從構(gòu)建好的抗性品系cDNA文庫中擴(kuò)增出兩基因完整開讀框，通過基因重組方法，成功構(gòu)建NYD-Ch和NYD-Tr基因原核和真核表達(dá)載體，并初步探討了兩基因的原核誘導(dǎo)表達(dá)。為后續(xù)研究NYD-Ch和NYD-Tr基因抗性品系中高表達(dá)在淡色庫蚊抗性產(chǎn)生中的分子機(jī)制、媒介抗性產(chǎn)生機(jī)理以及媒介綜合防治奠定基礎(chǔ)。 第一部分：抗性相關(guān)基因NYD-Ch和NYD-Tr原核、真核表達(dá)載體的構(gòu)建 根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室報(bào)道的在淡色庫蚊溴氰菊酯抗性品系中高表達(dá)的NYD-Ch和NYD-Tr基因的cDNA全長序列，設(shè)計(jì)引物，從本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的淡色庫蚊溴氰菊酯抗性品系全長cDNA文庫中，通過PCR方法獲取基因的完整開讀框序列。引物設(shè)計(jì)時(shí)，根據(jù)原核表達(dá)載體pET-28a（+）和真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）、pEGFP-C3表達(dá)的需... 

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 抗性相關(guān)基因NYD-Ch和NYD-Tr原核、真核表達(dá)載體的構(gòu)建
第二部分 多克隆抗CHY和TRY抗體的制備和抗性的初步檢測
第三部分 抗藥性相關(guān)基因NYD-Ch和NYD-Tr原核誘導(dǎo)表達(dá)和鑒定
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄: 淡色庫蚊抗性相關(guān)NYD-OP~*基因全長cDNA克隆與序列分析
致謝
綜述: RNA干涉研究進(jìn)展及其在寄生蟲學(xué)中的應(yīng)用


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]淡色庫蚊對溴氰菊酯抗藥性品系cDNA表達(dá)文庫的構(gòu)建和初步鑒定[J]. 田海生,李秀蘭,馬磊,沈波,朱昌亮.  中國人獸共患病雜志. 2001(04)
[3]濾紙法測定淡色庫蚊乙酰膽堿酯酶活性的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王新國,趙玉強(qiáng),甄天民.  中國寄生蟲病防治雜志. 1997(04)



本文編號：3672668