發(fā)布時(shí)間：2022-08-02 11:51

　　目的:建立BD FACSAria II流式細(xì)胞分選儀富集PX458空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染J774A.1細(xì)胞的方法并進(jìn)行技術(shù)優(yōu)化,確立用于篩選J774A.1細(xì)胞的最佳條件。方法:構(gòu)建PX458空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染J774A.1細(xì)胞株,進(jìn)行7-AAD染色。選擇BD FACSAria II流式細(xì)胞分選儀的100 μm噴嘴以及initial、4-way purity、purity、yield、fine tune、single cell 6種分選模式分選J774A.1細(xì)胞的GFP陽(yáng)性轉(zhuǎn)染株,比較儀器各部分參數(shù)變化對(duì)分選效率的影響。結(jié)果:在儀器穩(wěn)定的液流條件下,100 μm噴嘴各分選模式所得細(xì)胞純度均達(dá)80%以上,其中purity模式分選效率最高,達(dá)95.7%±1.0%。結(jié)論:使用BD FACSAria II流式細(xì)胞分選儀100 μm噴嘴分選PX458空載轉(zhuǎn)染的J774A.1細(xì)胞選擇purity分選模式最合適。 

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染:
        1.2.2 Western blot鑒定:
        1.2.3 細(xì)胞上機(jī)前處理及染色:
        1.2.4 流式細(xì)胞儀調(diào)試:
        1.2.5 流式細(xì)胞分選與分選效率檢測(cè):
        1.2.6細(xì)胞培養(yǎng)與凍存:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 GFP蛋白表達(dá)鑒定
    2.3 主液流調(diào)試
    2.4 分選模式與分選純度
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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