原發(fā)性高血壓是一種血壓不明原因升高的多基因遺傳病。已證明腎素、血管緊張素系統(tǒng)（RAS）與高血壓的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。為探討原發(fā)性高血壓的分子遺傳機(jī)制，我們進(jìn)行了攜帶人腎素基因及血管緊張素原基因轉(zhuǎn)基因小鼠的初步研究。堿裂解法提取克隆人腎素基因及血管緊張素原基因的質(zhì)粒，PEG8000純化。限制性酶切圖譜分析證實(shí)這兩個(gè)基因的結(jié)構(gòu)是完整的，符合轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)要求。玻璃粉洗脫法對上述基因進(jìn)一步純化。用微注射法將其導(dǎo)入小鼠受精卵的雄性原核。注射后成活的卵移植到假孕母鼠輸卵管。共移植34只鼠，其中11只懷孕，產(chǎn)仔40只。提取鼠尾DNA作Southern雜交分析。結(jié)果表明4只鼠有人腎素基因整合，整合率為10％。血管緊張素原基因末檢測到。取轉(zhuǎn)基因陽性鼠腎臟提取總RNA，用人腎素cDNA作探針進(jìn)行Northern雜交，結(jié)果顯示，2只轉(zhuǎn)基因陽性鼠腎臟有人腎素mRNA合成。本實(shí)驗(yàn)為建立攜帶人腎素基因及血管緊張素原基因的轉(zhuǎn)基因高血壓鼠奠定了基礎(chǔ)。該工作仍在進(jìn)行中。 

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物—高血壓研究中的一個(gè)新動(dòng)物模型
    二、轉(zhuǎn)基因小鼠在心血管研究中的應(yīng)用
第二部分 質(zhì)粒phRNTM15及phANTM14的擴(kuò)增、純化及限制性內(nèi)切酶圖譜分析
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果與分析
    四、討論
    五、圖版
第三部分 攜帶人腎素及血管緊張素原基因的轉(zhuǎn)基因小鼠的初步建立
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果與分析
    四、討論
第四部分 結(jié)論
圖版
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3659320