目的：從HCMV AD169中擴(kuò)增出pp65（1006-1521nt）抗原優(yōu)勢表位基因，分別克隆至原核和真核表達(dá)載體，制備了pp65蛋白質(zhì)疫苗和pp65 DNA疫苗；觀察其誘導(dǎo)Balb／c小鼠產(chǎn)生的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答，并對(duì)影響DNA免疫效果的因素進(jìn)行了初步探討和優(yōu)化：研究他們阻斷HCMV先天性感染的免疫保護(hù)程度。為預(yù)防母體原發(fā)性感染，阻止先天性HCMV感染尋找新的有效途徑。 方法：（一） 提取HCMV DNA，然后以其為模板擴(kuò)增出pp65（1006-1521nt）基因片段，克隆至原核表達(dá)載體pET100-TOPO和pcDNA3.1-TOPO真核表達(dá)載體，分別在E．coli BL21和SP2／0細(xì)胞中進(jìn)行外源目的基因的表達(dá)，鑒定其特異性和免疫原性。大量表達(dá)和純化pp65目的片段蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)疫苗）；大量提取并純化真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1-pp65 DNA（核酸疫苗）；（二） 為了觀察其誘導(dǎo)Balb／c小鼠產(chǎn)生的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答，36只Balb／c小鼠隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F6組，每組6只。A組（pp65蛋白質(zhì)疫苗組）每只小鼠初次分別經(jīng)背部皮下多點(diǎn)注射50... 

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
1 中文摘要
2 英文摘要
3 研究背景
4 第一部分pp65抗原優(yōu)勢表位基因的原核和真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
    4.3 結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
5 第二部分HCMV pp65DNA疫苗誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的免疫應(yīng)答及免疫效果影響因素探討
    5.1 前言
    5.2 材料和方法
    5.3 結(jié)果
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
6 第三部分pp65 DNA疫苗及DNA初始／蛋白質(zhì)加強(qiáng)聯(lián)合免疫阻斷HCMV先天性感染的免疫保護(hù)作用研究
    6.1 前言
    6.2 材料和方法
    6.3 結(jié)果
    6.4 討論
    6.5 小結(jié)
7 小結(jié)
8 參考文獻(xiàn)
9 附錄一:個(gè)人簡歷
10 附錄二:致謝
11 附錄三
    11.1 綜述
    11.2 參考文獻(xiàn)
12 中英文詞對(duì)照表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人巨細(xì)胞病毒先天性感染胎鼠致肝臟損傷的小鼠模型[J]. 湯正好,王明麗,袁中玉,李京培.  中華傳染病雜志. 2001(06)
[2]人巨細(xì)胞病毒先天性感染對(duì)ICR鼠胚胎生長及腦組織發(fā)育的影響[J]. 柳燕,王明麗,周勇.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(02)
[3]先天性人巨細(xì)胞病毒感染胎鼠大腦皮質(zhì)鈣調(diào)素基因mRNA的研究[J]. 陳貴海,王明麗,袁中玉.  中華神經(jīng)科雜志. 2000(04)
[4]人巨細(xì)胞病毒先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染小鼠模型的建立[J]. 王明麗,唐久來,胡聞,史百芬,胡勇,畢克菊,李京培.  動(dòng)物學(xué)報(bào). 2000(02)
[5]人巨細(xì)胞病毒感染新生乳鼠原代培養(yǎng)腦神經(jīng)細(xì)胞研究[J]. 王明麗,陳貴海,唐久來,史百芬,胡勇,汪紅俊,李京培,任斌.  病毒學(xué)報(bào). 1999(02)



本文編號(hào)：3654565