目的:通過慢病毒將血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）基因轉(zhuǎn)染于人脂肪干細胞（HADSCs）,檢測其上清液（CM）中生長因子的表達,并用其上清液作用于人皮膚成纖維細胞（HDFs）及人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）,觀察對這2種細胞活力和遷移的影響。方法:準(zhǔn)備HADSCs、HDFs及HUVECs 3種細胞并鑒定;將攜帶VEGF165基因的慢病毒轉(zhuǎn)染于HADSCs,定時收集上清液;ELISA法檢驗上清中生長因子分泌情況;將VEGF-CM與完全培養(yǎng)液以一定比例混合分為5組,分別培養(yǎng)HDFs及HUVECs,CCK-8法檢驗對2種細胞活力的影響;將最佳比例的VEGF-CM、正常CM（Nor-CM）和完全培養(yǎng)液分別作用于HDFs及HUVECs,劃痕法測試出對2種細胞遷移的影響。結(jié)果:ELISA結(jié)果表明VEGF-CM中VEGF及堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）的表達均較Nor-CM組提高;相對于其它比例,當(dāng)完全培養(yǎng)液與VEGF-CM以1∶2的比例混合時,HDFs和HUVECs的活力顯著增強（P<0.05）;VEGF-CM與其它培養(yǎng)液相比可顯著提高HDFs和HUVECs的遷移能力（P<0.05）... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2019,35(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 主要試劑與儀器
    2 主要方法
        2.1 HADSCs的分離、培養(yǎng)和鑒定
        2.2 HDFs的培養(yǎng)和鑒定
        2.3 HUVECs的培養(yǎng)和鑒定
        2.4慢病毒轉(zhuǎn)染HADSCs并收集上清
        2.5檢測上清中VEGF及bFGF的表達
        2.6 VEGF-CM對HDFs和HUVECs活力的影響
        2.7 VEGF-CM對HDFs和HUVECs遷移的影響
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 細胞的生物學(xué)特性
    2 VEGF165慢病毒轉(zhuǎn)染后HADSCs及細胞因子表達
    3 VEGF-CM對HDFs及HUVECs活力的影響
    4 VEGF-CM對HDFs及HUVECs遷移的影響
討 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]脂肪干細胞分泌功能的研究進展及應(yīng)用前景[J]. 李江璇,肖麗玲.  廣東醫(yī)學(xué). 2014(02)
[2]VEGF和bFGF在大鼠壓瘡模型中的表達及其意義[J]. 黃芳,楊晶金,王雪玲,侯勇,張燕萍,金喜強,梁勇.  中國病理生理雜志. 2012(08)
[3]同種異體脂肪干細胞門脈移植對大鼠纖維化肝臟的影響[J]. 王于,連帆,譚國勝,范文哲,向賢宏,陳偉,楊建勇,李家平.  中國病理生理雜志. 2010(11)



本文編號：3621374