小鼠肝臟體外復(fù)灌系統(tǒng)的建立
發(fā)布時間：2022-02-11 22:40
目的建立小鼠肝臟體外復(fù)灌系統(tǒng),并驗(yàn)證其有效性。方法 6只雄性C57小鼠獲取肝臟后冷保存45 min內(nèi)行體外復(fù)灌,復(fù)灌前獲取同種屬小鼠血液配制復(fù)灌液。小鼠復(fù)灌系統(tǒng)以多軸蠕動泵作為動力,實(shí)行門靜脈單通道灌注,在灌注系統(tǒng)中加入輸液器滴斗以緩沖壓力和排氣,2個小動物膜式氧合器串聯(lián)以達(dá)到攜氧要求,灌注系統(tǒng)總液體量約30 mL,復(fù)灌流量設(shè)定為2.5 mL·min-1·g-1。采用雙托盤形式,滿足小鼠肝臟正常體位。應(yīng)用生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄入肝壓力等灌注參數(shù),監(jiān)測灌注液ALT、AST、肝組織病理及細(xì)胞凋亡等指標(biāo)。結(jié)果小鼠肝臟體外復(fù)灌過程中,門靜脈壓力低于8 mmHg,系統(tǒng)壓力波動小于1 mmHg,灌注液pH值維持在7.40±0.05。復(fù)灌6 h結(jié)束時,灌注液ALT、AST和乳酸脫氫酶分別為（62±14）、（160±23）和（682±71） U/L,乳酸為（3.2±0.1） mmol/L。肝組織病理示肝小葉結(jié)構(gòu)完整,實(shí)質(zhì)細(xì)胞無明顯壞死,病理學(xué)評分（1.1±0.7）分。原位缺口末端標(biāo)記法檢測肝細(xì)胞凋亡率為（0.57±0.22）%。結(jié)論本研究國內(nèi)首次構(gòu)建了小鼠肝臟...
【文章來源】：中華移植雜志(電子版). 2019,13(02)
【文章頁數(shù)】：5 頁
【部分圖文】：
小鼠肝臟體外復(fù)灌系統(tǒng)
mHg;復(fù)灌系統(tǒng)內(nèi)，入肝氧分壓＞500mmHg，出肝氧分壓＞60mmHg且氧飽和度＞70%，運(yùn)行穩(wěn)定。入肝灌注液以及灌注盤液體溫度始終維持在(36．0±0．5)℃。此外，該系統(tǒng)不需要管道重復(fù)使用，每次肝臟復(fù)灌僅需要一套新靜脈輸液器。由于整合了管道系統(tǒng)及小動物膜式氧合器，僅需約30mL復(fù)灌液即可穩(wěn)定運(yùn)行。2．2門靜脈壓力血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示，復(fù)灌前后灌注液pH值始終維持在7．40±0．05。小鼠肝臟接入系統(tǒng)后，門靜脈初始壓力約4mmHg，隨著灌注時間延長，壓力輕微上升，但始終＜8mmHg。復(fù)灌6h結(jié)束時小鼠肝臟大體觀無明顯改變(見圖2)。注:a．復(fù)灌開始;b．復(fù)灌6h圖2小鼠肝臟體外復(fù)灌大體觀2．3肝功能及乳酸代謝復(fù)灌過程中，灌注液轉(zhuǎn)氨酶升高緩慢，乳酸水平自復(fù)灌2h后持續(xù)下降(見圖3)。復(fù)灌6h后，灌注液ALT、AST和乳酸脫氫酶分別為(62±14)、(160±23)和(682±71)U/L，乳酸為(3．2±0．1)mmol/L。圖3小鼠肝臟體外復(fù)灌過程中灌注液肝功能及代謝指標(biāo)
?孟低巢?需要管道重復(fù)使用，每次肝臟復(fù)灌僅需要一套新靜脈輸液器。由于整合了管道系統(tǒng)及小動物膜式氧合器，僅需約30mL復(fù)灌液即可穩(wěn)定運(yùn)行。2．2門靜脈壓力血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示，復(fù)灌前后灌注液pH值始終維持在7．40±0．05。小鼠肝臟接入系統(tǒng)后，門靜脈初始壓力約4mmHg，隨著灌注時間延長，壓力輕微上升，但始終＜8mmHg。復(fù)灌6h結(jié)束時小鼠肝臟大體觀無明顯改變(見圖2)。注:a．復(fù)灌開始;b．復(fù)灌6h圖2小鼠肝臟體外復(fù)灌大體觀2．3肝功能及乳酸代謝復(fù)灌過程中，灌注液轉(zhuǎn)氨酶升高緩慢，乳酸水平自復(fù)灌2h后持續(xù)下降(見圖3)。復(fù)灌6h后，灌注液ALT、AST和乳酸脫氫酶分別為(62±14)、(160±23)和(682±71)U/L，乳酸為(3．2±0．1)mmol/L。圖3小鼠肝臟體外復(fù)灌過程中灌注液肝功能及代謝指標(biāo)
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]“陸止于此,海始于斯”:機(jī)械灌注將成為供肝保存修復(fù)新常態(tài)[J]. 賈俊君,李建輝,鄭樹森. 中華移植雜志(電子版). 2018(03)
[2]豬肝臟常溫機(jī)械灌注系統(tǒng)的建立和改良[J]. 吳勁進(jìn),張啟逸,段繼軒,田陽,陳輝,屠振華,葛頌,嚴(yán)盛,謝海洋,鄭樹森. 中華肝膽外科雜志. 2016 (12)
[3]大鼠原位肝臟低溫灌注和復(fù)流模型的建立及意義[J]. 胡建平,錢建民,王學(xué)浩,陸森,孫倍成,張浩. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2001(04)
[4]大鼠肝臟離體再灌注模型的建立及改進(jìn)[J]. 趙聞雨,熊海云,袁清,朱有華. 中華器官移植雜志. 2009 (08)
本文編號：3621067
【文章來源】：中華移植雜志(電子版). 2019,13(02)
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【部分圖文】：
小鼠肝臟體外復(fù)灌系統(tǒng)
mHg;復(fù)灌系統(tǒng)內(nèi)，入肝氧分壓＞500mmHg，出肝氧分壓＞60mmHg且氧飽和度＞70%，運(yùn)行穩(wěn)定。入肝灌注液以及灌注盤液體溫度始終維持在(36．0±0．5)℃。此外，該系統(tǒng)不需要管道重復(fù)使用，每次肝臟復(fù)灌僅需要一套新靜脈輸液器。由于整合了管道系統(tǒng)及小動物膜式氧合器，僅需約30mL復(fù)灌液即可穩(wěn)定運(yùn)行。2．2門靜脈壓力血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示，復(fù)灌前后灌注液pH值始終維持在7．40±0．05。小鼠肝臟接入系統(tǒng)后，門靜脈初始壓力約4mmHg，隨著灌注時間延長，壓力輕微上升，但始終＜8mmHg。復(fù)灌6h結(jié)束時小鼠肝臟大體觀無明顯改變(見圖2)。注:a．復(fù)灌開始;b．復(fù)灌6h圖2小鼠肝臟體外復(fù)灌大體觀2．3肝功能及乳酸代謝復(fù)灌過程中，灌注液轉(zhuǎn)氨酶升高緩慢，乳酸水平自復(fù)灌2h后持續(xù)下降(見圖3)。復(fù)灌6h后，灌注液ALT、AST和乳酸脫氫酶分別為(62±14)、(160±23)和(682±71)U/L，乳酸為(3．2±0．1)mmol/L。圖3小鼠肝臟體外復(fù)灌過程中灌注液肝功能及代謝指標(biāo)
?孟低巢?需要管道重復(fù)使用，每次肝臟復(fù)灌僅需要一套新靜脈輸液器。由于整合了管道系統(tǒng)及小動物膜式氧合器，僅需約30mL復(fù)灌液即可穩(wěn)定運(yùn)行。2．2門靜脈壓力血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示，復(fù)灌前后灌注液pH值始終維持在7．40±0．05。小鼠肝臟接入系統(tǒng)后，門靜脈初始壓力約4mmHg，隨著灌注時間延長，壓力輕微上升，但始終＜8mmHg。復(fù)灌6h結(jié)束時小鼠肝臟大體觀無明顯改變(見圖2)。注:a．復(fù)灌開始;b．復(fù)灌6h圖2小鼠肝臟體外復(fù)灌大體觀2．3肝功能及乳酸代謝復(fù)灌過程中，灌注液轉(zhuǎn)氨酶升高緩慢，乳酸水平自復(fù)灌2h后持續(xù)下降(見圖3)。復(fù)灌6h后，灌注液ALT、AST和乳酸脫氫酶分別為(62±14)、(160±23)和(682±71)U/L，乳酸為(3．2±0．1)mmol/L。圖3小鼠肝臟體外復(fù)灌過程中灌注液肝功能及代謝指標(biāo)
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]“陸止于此,海始于斯”:機(jī)械灌注將成為供肝保存修復(fù)新常態(tài)[J]. 賈俊君,李建輝,鄭樹森. 中華移植雜志(電子版). 2018(03)
[2]豬肝臟常溫機(jī)械灌注系統(tǒng)的建立和改良[J]. 吳勁進(jìn),張啟逸,段繼軒,田陽,陳輝,屠振華,葛頌,嚴(yán)盛,謝海洋,鄭樹森. 中華肝膽外科雜志. 2016 (12)
[3]大鼠原位肝臟低溫灌注和復(fù)流模型的建立及意義[J]. 胡建平,錢建民,王學(xué)浩,陸森,孫倍成,張浩. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2001(04)
[4]大鼠肝臟離體再灌注模型的建立及改進(jìn)[J]. 趙聞雨,熊海云,袁清,朱有華. 中華器官移植雜志. 2009 (08)
本文編號：3621067
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