發(fā)布時間：2022-02-09 17:37

　　目的建立脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）/D-氨基半乳糖（D-galactosamine,D-GalN）誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型。方法 40只雌性C57BL/6小鼠用于觀察8種不同LPS與D-GalN劑量配比聯(lián)合刺激后小鼠存活時間,以確定模型建立的最佳劑量。使用腹腔注射最佳劑量染毒32只雌性C57BL/6小鼠,分別在0、1、4、8 h處死,每組8只,0 h注射相同劑量生理鹽水作為對照。觀察染毒后小鼠肝組織病理損傷,檢測血清中ALT及炎癥因子IL-6、MCP-1和TNF-α表達(dá)水平變化。結(jié)果通過觀察小鼠存活時間,確定腹腔注射最佳染毒劑量為LPS（2.5 mg/kg）/D-GalN（0.3 g/kg）;小鼠染毒后肝組織呈進(jìn)程性病變,最終發(fā)展為肝臟彌漫性壞死,肝細(xì)胞核崩解。與對照組相比,血清ALT顯著升高（P<0.001）,IL-6、MCP-1、TNF-α均在1 h后達(dá)到最高水平（P<0.001）,然后持續(xù)下降。結(jié)論成功建立LPS/D-GaIN誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型,為探索急性肝損傷的致病機(jī)制以及藥物干預(yù)治療提供有效的動物模型。 

【文章來源】：中國實驗動物學(xué)報. 2014,22(03)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同配比劑量LPS和D-GalN染毒C57BL/6小鼠存活率觀察Fig．1SurvivalratesoftheC57BL/6miceafterLPS/D-GalNadministrationindifferentdoses

中國實驗動物學(xué)報2014年6月第22卷第3期ActaLabAnimSciSin，June2014，Vol．22No．3圖3LPS/D-GalN染毒C57BL/6小鼠后血清ALT(A)、IL-6(B)、MCP-1(C)、TNF-α(D)的表達(dá)Fig．3TheconcentrationsofserumALT(A)，IL-6(B)，MCP-1(C)andTNF-α(D)intheC57BL/6miceafterLPS/D-GalNadministration細(xì)胞的凋亡和壞死，同時引起肝臟的損傷及出血［11－12］。D-氨基半乳糖(D-galactosamine，D-GalN)是常用的化學(xué)性肝毒性藥物，可快速結(jié)合并消耗大量的尿苷酸，影響肝細(xì)胞蛋白質(zhì)、酶等的生成，從而對肝細(xì)胞組織造成不可逆的損傷［10－12］。利用LPS/D-GalN誘導(dǎo)動物發(fā)生急性肝損傷，不僅能建立內(nèi)毒素性急性肝損傷動物模型，同時可用于急性重癥肝炎模型的研究［10－12］。但是不同的小鼠品系對不同劑量配比的LPS/D-GalN所產(chǎn)生的病理學(xué)損傷及炎癥免疫反應(yīng)存在差異［13－16］。為此，我們探索LPS和D-GalN的適宜給藥劑量，建立穩(wěn)定的急性肝損傷動物模型，為進(jìn)一步開展急性肝損傷的損傷機(jī)制、生理機(jī)制研究及對治療藥物評價奠定基矗病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，以LPS/D-GalN染毒小鼠，小鼠肝損傷呈急性漸進(jìn)式發(fā)展。正常C57BL/6小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清楚，隨著病程的發(fā)展，肝組織由散在的點狀灶性壞死，肝細(xì)胞胞質(zhì)疏松發(fā)展至彌漫性的大面積出血性壞死，細(xì)胞核崩解，無肝小葉正常結(jié)構(gòu)。ALT存在于肝細(xì)胞的胞質(zhì)中，當(dāng)發(fā)生肝組織急性損傷時，肝細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞，通透性增加，ALT從細(xì)胞內(nèi)到細(xì)胞外而進(jìn)入血液，使血清中ALT水平明顯升高，是急性肝損傷的重要的早期檢測指標(biāo)之一。在四氯化碳或病毒誘導(dǎo)的急性肝損傷模型中均能檢測到血清中ALT水平急劇升高［9］，本研究中ALT在LPS/D-GalN染毒后早期即迅速上調(diào)，提示組織的早期即受到一定程度的損傷。越來越多

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Lethal effect and apoptotic DNA fragmentation in response of D-GalN-treated mice to bacterial LPS can be suppressed by pre-exposure to minute amount of bacterial LPS: Dual role of TNF receptor 1[J]. Marina Gumenscheimer,Marina A. Freudenberg,Chris Galanos.  World Journal of Gastroenterology. 2005(22)
[2]Toll樣受體4在D-氨基半乳糖/內(nèi)毒素介導(dǎo)的急性肝損傷中的表達(dá)[J]. 晏春根,謝青,周霞秋,徐玉敏,俞紅,郭清.  中華傳染病雜志. 2004(03)



本文編號：3617396