天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當(dāng)前位置:主頁 > 醫(yī)學(xué)論文 > 病理論文 >

人可溶性CD14檢測體系的建立及應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2022-01-22 11:21
  可溶性CD14檢測體系的建立及其應(yīng)用研究 CD14是革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素脂多糖(LPS)的高親和力受體之一。除LPS外,CD14還介導(dǎo)肽聚糖(PGN)、脂磷壁酸(LTA)、脂蛋白等多種病原體成分與細(xì)胞的反應(yīng),它是天然免疫中重要的模式識別分子。CD14有兩種存在形式:細(xì)胞膜表面的膜型受體(mCD14)和可溶性受體(sCD14)。sCD14存在于人體血液,腦脊液等體液中,在感染、創(chuàng)傷、燒傷和SLE等多種疾病中,sCD14的水平會升高,且與疾病的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。目前sCD14已成為機體單核/巨噬細(xì)胞活化的標(biāo)志,用于監(jiān)測疾病的發(fā)生和發(fā)展。 國內(nèi)關(guān)于sCD14的研究極少,究其原因,與目前尚無國產(chǎn)試劑盒而國外進口試劑盒價格昂貴有關(guān)。為解決這一困難,推動該領(lǐng)域的研究,并為國內(nèi)關(guān)于CD14的基礎(chǔ)研究和臨床研究提供技術(shù)支持,本研究建立了人sCD14單多抗雙夾心ELISA檢測體系;同時,還從人血漿中提取了天然sCD14,并進行了人CD14基因的克隆和表達(dá),為在后續(xù)工作能深入研究CD14的生物學(xué)功能,探討CD14與Toll樣受體的相互作用以及在抗感染免疫中發(fā)揮的作用奠定了必要的基礎(chǔ)。 一、建... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:92 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

人可溶性CD14檢測體系的建立及應(yīng)用研究


一人THPI一CD14細(xì)胞總RNAFig.2召To扭1RNAfromTHPI一CD14圖2一RT一PCR擴增人CD14全長基因Fig·2礴DNAseg皿entsofhumanCD14byRT一PCR

重組載體,片斷,基因


3:Clone4digestodbyEeoIU&Xbal4:Clone5digestodbyEeoRI&Xbal圖2一7重組載體pUCmTzeDi4的單酶切鑒定Fig.2一7ldentineationofPUCmT/CD14byEeoRIl:MarkerDL150002:Clone2digestedbyEeoRI3:Clone4digestedbyEeoRI4:Clone5digestedbyEeoRI四、構(gòu)建重組人CD14原核表達(dá)載體將構(gòu)建的重組pET28b/cD14質(zhì)粒轉(zhuǎn)化T叩一10F’感受態(tài)細(xì)胞后,挑取單菌落,提取質(zhì)粒進行PCR和酶切鑒定。如圖2一8,PCR鑒定擴增出約1000bp的基因片斷,用BamHI和EcoRI雙酶切也出現(xiàn)了約1000bp的基因片斷(圖2一9),均與預(yù)期結(jié)果一致。對該陽性克隆進行測序鑒定,證明本實驗成功構(gòu)建了pET28b/cD14原核表達(dá)載體,目的基因插入表達(dá)載體中,讀碼框正確。

重組質(zhì)粒,重組蛋白


l:MafkerDL20002:PCRProductofPET28b/CD14圖2一9Bamm&Ec。班雙酶切鑒定重組PET28blCD14質(zhì)粒Fig.2一9Iden成eationofPET28b/CD14byBamm&Eeoml:MarkerDL20002:PET28b/CD14digestedbyBamHI&ECORI五、SDS一pAGE鑒定reDi4原核表達(dá)蛋白重組pET28b/CD14質(zhì)粒轉(zhuǎn)化BL21(DE3)表達(dá)菌,經(jīng)過IPTo誘導(dǎo)表達(dá)后,與空載體對照和誘導(dǎo)前表達(dá)菌對照相比,表達(dá)菌經(jīng)誘導(dǎo)后在66kDa和43kDa之間出現(xiàn)了較明顯的表達(dá)蛋白,蛋白分子量與預(yù)期一致(圖2一10)。六、分析重組蛋白在大腸桿菌中的分布和存在形式及Westernblot鑒定如圖2一11cD14重組蛋白是以包涵體形式存在,表達(dá)菌超聲后上清中沒有可溶性重組蛋白,Westemblot結(jié)果證明重組蛋白能夠與小鼠抗人CD14單抗60bca特異性結(jié)合。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]動態(tài)觀察急性腦血管病患者血漿腫瘤壞死因子-α含量變化的臨床意義[J]. 畢國榮,盧麗萍,劍非.  臨床神經(jīng)病學(xué)雜志. 1999(02)



本文編號:3602105

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/binglixuelunwen/3602105.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶1a069***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
亚洲熟妇av一区二区三区色堂| 久久99这里只精品热在线| 午夜国产精品国自产拍av| 美女激情免费在线观看| 女厕偷窥一区二区三区在线| 区一区二区三中文字幕| 一二区中文字幕在线观看| 免费人妻精品一区二区三区久久久| 亚洲清纯一区二区三区| 精品国产亚洲一区二区三区| 女生更色还是男生更色| 日本熟妇五十一区二区三区| 九七人妻一区二区三区| 亚洲精品国产精品日韩| 99久久人妻精品免费一区| 欧美日韩一级aa大片| 麻豆看片麻豆免费视频| 亚洲最新一区二区三区| 日本理论片午夜在线观看| 日本最新不卡免费一区二区| 爱草草在线观看免费视频| 日韩夫妻午夜性生活视频| 久草精品视频精品视频精品| 国产精品一区二区不卡中文| 亚洲最新的黄色录像在线| 偷拍偷窥女厕一区二区视频| 国产二级一级内射视频播放| 久久精品一区二区少妇| 亚洲中文字幕高清乱码毛片| 国产精品一区二区有码| 久久精品国产在热亚洲| 国产一区二区在线免费| 国产不卡一区二区四区| 日本视频在线观看不卡| 亚洲一区二区福利在线| 亚洲欧洲在线一区二区三区| 亚洲妇女黄色三级视频| 美女露小粉嫩91精品久久久| 日本最新不卡免费一区二区| 人妻少妇久久中文字幕久久| 一二区中文字幕在线观看|