發(fā)布時(shí)間：2017-05-12 07:11

  本文關(guān)鍵詞：白念珠菌Sap與伊曲康唑耐藥性關(guān)系的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1、通過(guò)牛血清白蛋白培養(yǎng)基(BSA)檢測(cè)白念珠菌伊曲康唑耐藥株和敏感株分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)的活性差異。2、通過(guò)動(dòng)物(小鼠)實(shí)驗(yàn)比較白念珠菌伊曲康唑耐藥株和敏感株的毒力及致病性差異。3、通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR(RT-PCR)比較白念珠菌伊曲康唑耐藥組和敏感組SAP2、CDR1、CDR2及MDR1 m RNA表達(dá)水平的差異。方法:1、收集臨床上可疑的真菌標(biāo)本,分離、培養(yǎng)、鑒定出白念珠菌伊曲康唑耐藥菌株與敏感菌株。用BSA培養(yǎng)基檢測(cè)白念珠菌伊曲康唑耐藥株和敏感株Sap活性差異,并作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2、將小鼠隨機(jī)分為3個(gè)組(耐藥組、敏感組和空白對(duì)照組),取白念珠菌伊曲康唑耐藥菌株和敏感菌株的菌懸液(或無(wú)菌生理鹽水)分別注入小鼠的尾靜脈,觀察1個(gè)月(30天),統(tǒng)計(jì)小鼠的生存情況及存活天數(shù),計(jì)算小鼠的死亡率和生存率。3、RT-PCR檢測(cè)白念珠菌伊曲康唑耐藥組和敏感組菌株的SAP2、CDR1、CDR2以及MDR1 m RNA的表達(dá)水平,并作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1、共檢出白念珠菌菌株40株,白念珠菌伊曲康唑耐藥株20株,敏感株20株。所有檢測(cè)的白念珠菌伊曲康唑耐藥株(20株)和敏感株(20株)均有透明環(huán)產(chǎn)生,白念珠菌伊曲康唑耐藥組Pz值=0.611±0.015,敏感組Pz值=0.667±0.015,兩組菌株Sap活性差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=11.935,P0.001),即耐藥組Sap活性明顯高于敏感組。2、白念珠菌伊曲康唑耐藥組小鼠1個(gè)月內(nèi)死亡16只,死亡率是80%;敏感組小鼠死亡7只,死亡率是35%;兩組小鼠的死亡率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2c=8.286,P=0.004),即耐藥組菌株對(duì)小鼠的致病性及毒力明顯高于敏感組。3、RT-PCR分析白念珠菌伊曲康唑耐藥組和敏感組SAP2、CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表達(dá)量,耐藥組SAP2基因m RNA(2.015±0.304)表達(dá)水平高于敏感組(0.732±0.215),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=15.425,P0.001)。耐藥組CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表達(dá)與敏感組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;SAP2和MDR1基因在轉(zhuǎn)錄水平有明顯正相關(guān)(r=0.696,P0.001),CDR1和CDR2在轉(zhuǎn)錄水平有明顯正相關(guān)(r=0.837,P0.001)。結(jié)論:1、白念珠菌伊曲康唑耐藥組Sap活性高于敏感組。2、白念珠菌伊曲康唑耐藥組的毒力及對(duì)小鼠的致病性高于敏感組。3、白念珠菌伊曲康唑耐藥組SAP2基因m RNA表達(dá)水平高于敏感組;SAP2和MDR1基因可能受同一調(diào)控機(jī)制調(diào)節(jié);CDR1和CDR2基因可能受同一調(diào)控機(jī)制調(diào)節(jié)。白念珠菌Sap與耐藥有一定關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：白念珠菌 耐藥 分泌型天冬氨酸蛋白酶 毒力
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R379.4
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表11-12
• 前言12-15
• 第一部分 白念珠菌菌株的收集、培養(yǎng)、鑒定、體外藥敏實(shí)驗(yàn)及Sap活性的檢測(cè)15-27
• 1 材料與方法15-20
• 1.1 菌株來(lái)源15
• 1.2 主要儀器和設(shè)備15-16
• 1.3 主要試劑16
• 1.4 主要培養(yǎng)基的制備16-17
• 1.5 實(shí)驗(yàn)方法17-19
• 1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法19-20
• 2 結(jié)果20-24
• 2.1 真菌培養(yǎng)、鑒定及體外藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-22
• 2.2 白念珠菌耐藥株和敏感株Sap活性的測(cè)定結(jié)果22-24
• 3 討論24-26
• 4 結(jié)論26-27
• 第二部分 白念珠菌伊曲康唑耐藥株和敏感株的毒力及對(duì)小鼠致病性的研究27-34
• 1 材料與方法27-29
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物27
• 1.2 主要儀器和設(shè)備27
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法27-28
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法28-29
• 2 結(jié)果29-32
• 3 討論32-33
• 4 結(jié)論33-34
• 第三部分 白念珠菌伊曲康唑耐藥株和敏感株SAP2及外排泵相關(guān)基因表達(dá)的分析34-45
• 1 材料與方法34-39
• 1.1 主要儀器和設(shè)備34
• 1.2 主要試劑34-35
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法35-38
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法38-39
• 2 結(jié)果39-42
• 2.1 RT-PCR結(jié)果39-40
• 2.2 相關(guān)性分析40-42
• 3 討論42-44
• 4 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 綜述51-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 致謝59-60
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果60-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 葉夏云;敖燕;鐘建庭;劉麗;劉冬梅;;白念珠菌的毒力及其對(duì)氟康唑耐藥性的相關(guān)性研究[J];中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志;2006年07期

  本文關(guān)鍵詞：白念珠菌Sap與伊曲康唑耐藥性關(guān)系的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：359130