目的通過比較新材料與傳統(tǒng)材料在膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)中的優(yōu)劣及特點(diǎn),優(yōu)化小鼠膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型。方法利用q PCR、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光等手段,表征膠質(zhì)細(xì)胞組成比例與細(xì)胞純度。在LPS刺激下,從mRNA與蛋白水平,評估不同包被材料對細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。結(jié)果 LPS(100μg·L^-1)刺激48 h,混合膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子表達(dá)量明顯高于小膠質(zhì)細(xì)胞,如PDL包被時,混合膠質(zhì)細(xì)胞TNF-α表達(dá)量為（903. 8±322. 2） ng·L^-1,明顯高于小膠質(zhì)細(xì)胞（565. 4±159. 8） ng·L^-1; Matrigel包被時,混合膠質(zhì)細(xì)胞表層的小膠質(zhì)細(xì)胞狀態(tài)更佳。而小膠質(zhì)細(xì)胞在未包被時,對LPS更為敏感,TNF-α水平為（6861. 4±1606. 6） ng·L^-1。結(jié)論 Matrigel包被培養(yǎng)的混合膠質(zhì)細(xì)胞,可最大程度模擬體內(nèi)環(huán)境,為建立膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型的最佳條件;評估炎癥模型應(yīng)以蛋白水平檢測結(jié)果為主要指標(biāo)。 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報. 2019,35(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試劑
    1.2 儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)動物
2 方法
    2.1 培養(yǎng)材料表面處理
    2.2 細(xì)胞懸液制備及培養(yǎng)
    2.3 混合膠質(zhì)細(xì)胞的制備
    2.4 小膠質(zhì)細(xì)胞的制備
    2.5 實(shí)時熒光定量PCR檢測
    2.6 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
    2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測
    2.8 吞噬試驗(yàn)
    2.9 液相芯片多因子檢測
    2.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 膠質(zhì)細(xì)胞表征
        3.1.1 q PCR表征混合細(xì)胞中各類細(xì)胞特征性標(biāo)記物mR-NA相對轉(zhuǎn)錄水平隨時間的變化
        3.1.2 免疫熒光表征小膠質(zhì)細(xì)胞純度
        3.1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測混合膠質(zhì)細(xì)胞中各細(xì)胞所占的比例
        3.1.4 小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬功能檢測
    3.2 包被條件對膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
        3.2.1 mRNA水平初步探究包被條件對膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
            3.2.1. 1 包被條件對混合膠質(zhì)細(xì)胞的影響
            3.2.1. 2 包被條件對小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
        3.2.2 深入探究包被條件對膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
            3.2.2. 1 包被條件對混合膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)與生長的影響
            3.2.2. 2 包被條件對混合膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
            3.2.2. 3 包被條件對小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥模型評價的影響
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞共培養(yǎng)模型及其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究中的應(yīng)用[J]. 楊盛,何然,張飛燕,薛強(qiáng),徐曉玉.  藥學(xué)學(xué)報. 2016(03)
[2]阿魏酸對小膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)的抑制作用[J]. 吳建良,沈敏敏,楊水新,王翔,馬增春.  中國藥理學(xué)通報. 2015(01)



本文編號：3589799