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腸道細(xì)菌相關(guān)代謝產(chǎn)物脫氧膽酸的量效和時(shí)效對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-01-13 02:59
  目的觀察脫氧膽酸對(duì)線蟲(chóng)生存和生長(zhǎng)發(fā)育的影響,了解脫氧膽酸的作用。方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,其中實(shí)驗(yàn)組分為低濃度組、中濃度組和高濃度組。將L1期線蟲(chóng)放于實(shí)驗(yàn)組中培養(yǎng)48 h后觀察不同濃度的脫氧膽酸對(duì)線蟲(chóng)生長(zhǎng)的影響,在D0期(幼年成蟲(chóng)期)、D4期(線蟲(chóng)成年后第4天)、D6期(線蟲(chóng)成年后第6天)觀察不同濃度的脫氧膽酸對(duì)線蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)能力、抗感染能力、壽命和生殖能力的影響。結(jié)果不同濃度的脫氧膽酸對(duì)線蟲(chóng)生長(zhǎng)的影響未見(jiàn)明顯差異。在不同時(shí)間、不同濃度脫氧膽酸的作用下,線蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)能力隨著劑量的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)而降低,中高濃度脫氧膽酸可縮短線蟲(chóng)的壽命和降低抗感染能力,并呈劑量依賴性。高濃度的脫氧膽酸可以減少線蟲(chóng)的子代及縮短線蟲(chóng)的產(chǎn)卵時(shí)間。結(jié)論脫氧膽酸不影響線蟲(chóng)的生長(zhǎng)。大劑量的脫氧膽酸對(duì)線蟲(chóng)可能存在量效和時(shí)效的生殖毒性作用和慢性毒性作用,縮短線蟲(chóng)的壽命,降低線蟲(chóng)的運(yùn)動(dòng)及抗感染能力,其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。 

【文章來(lái)源】:中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2019,31(05)CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【部分圖文】:

腸道細(xì)菌相關(guān)代謝產(chǎn)物脫氧膽酸的量效和時(shí)效對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響


圖1脫氧膽酸化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

線蟲(chóng),生長(zhǎng)周期


圖2線蟲(chóng)生長(zhǎng)周期菌OP50NGM培養(yǎng)基上,每組設(shè)置3個(gè)平行,每板100條左右線蟲(chóng)。待線蟲(chóng)于NGM培養(yǎng)基上培養(yǎng)48h后,計(jì)數(shù)培養(yǎng)基中存活的線蟲(chóng)數(shù),并在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)存活線蟲(chóng)中各個(gè)發(fā)育階段的線蟲(chóng)數(shù)。1.2.5.2線蟲(chóng)的體長(zhǎng)將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,待其發(fā)育到L4期,用10%水合氯醛麻醉線蟲(chóng),用體式顯微鏡測(cè)量線蟲(chóng)體長(zhǎng)。每個(gè)培養(yǎng)基上測(cè)量10條線蟲(chóng)。1.2.6線蟲(chóng)生存實(shí)驗(yàn)1.2.6.1線蟲(chóng)壽命將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的普通培養(yǎng)基上,待其發(fā)育至L4期,轉(zhuǎn)移到加有FUDR(5-氟尿嘧啶脫氧核苷)的實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,每天觀察,記錄存活和死亡的線蟲(chóng)數(shù),以及觀察的時(shí)間,直到線蟲(chóng)全部死亡。1.2.6.2線蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)能力將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,分別觀察D0期(幼年成蟲(chóng)期,一般48h)、D4期(線蟲(chóng)成年后的第4天)、D6期(線蟲(chóng)成年后的第6天)的線蟲(chóng)每分鐘咽部抽吸頻率(pumping/min)以及每分鐘液體中的擺動(dòng)頻率(thrash/min)(將線蟲(chóng)放于新鮮的大腸埃希菌OP50上計(jì)數(shù)每分鐘咽部抽吸頻率;將線蟲(chóng)放于裝有2mL無(wú)菌M9溶液的培養(yǎng)皿中計(jì)數(shù)每分鐘液體中的擺動(dòng)頻率)。1.2.6.3線蟲(chóng)抗感染能力將已活化的PA14菌株涂在加有FUDR培養(yǎng)基上,放于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中過(guò)夜培養(yǎng),然后放于25℃培養(yǎng)箱中放置10h,待用。將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的普通培養(yǎng)基上,待其發(fā)育至L4期,轉(zhuǎn)移到加有FUDR并

線蟲(chóng),脫氧膽酸,培養(yǎng)基


圖2線蟲(chóng)生長(zhǎng)周期菌OP50NGM培養(yǎng)基上,每組設(shè)置3個(gè)平行,每板100條左右線蟲(chóng)。待線蟲(chóng)于NGM培養(yǎng)基上培養(yǎng)48h后,計(jì)數(shù)培養(yǎng)基中存活的線蟲(chóng)數(shù),并在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)存活線蟲(chóng)中各個(gè)發(fā)育階段的線蟲(chóng)數(shù)。1.2.5.2線蟲(chóng)的體長(zhǎng)將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,待其發(fā)育到L4期,用10%水合氯醛麻醉線蟲(chóng),用體式顯微鏡測(cè)量線蟲(chóng)體長(zhǎng)。每個(gè)培養(yǎng)基上測(cè)量10條線蟲(chóng)。1.2.6線蟲(chóng)生存實(shí)驗(yàn)1.2.6.1線蟲(chóng)壽命將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的普通培養(yǎng)基上,待其發(fā)育至L4期,轉(zhuǎn)移到加有FUDR(5-氟尿嘧啶脫氧核苷)的實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,每天觀察,記錄存活和死亡的線蟲(chóng)數(shù),以及觀察的時(shí)間,直到線蟲(chóng)全部死亡。1.2.6.2線蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)能力將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上,分別觀察D0期(幼年成蟲(chóng)期,一般48h)、D4期(線蟲(chóng)成年后的第4天)、D6期(線蟲(chóng)成年后的第6天)的線蟲(chóng)每分鐘咽部抽吸頻率(pumping/min)以及每分鐘液體中的擺動(dòng)頻率(thrash/min)(將線蟲(chóng)放于新鮮的大腸埃希菌OP50上計(jì)數(shù)每分鐘咽部抽吸頻率;將線蟲(chóng)放于裝有2mL無(wú)菌M9溶液的培養(yǎng)皿中計(jì)數(shù)每分鐘液體中的擺動(dòng)頻率)。1.2.6.3線蟲(chóng)抗感染能力將已活化的PA14菌株涂在加有FUDR培養(yǎng)基上,放于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中過(guò)夜培養(yǎng),然后放于25℃培養(yǎng)箱中放置10h,待用。將發(fā)育至L1期的線蟲(chóng)放到對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的普通培養(yǎng)基上,待其發(fā)育至L4期,轉(zhuǎn)移到加有FUDR并

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥中的作用及機(jī)制[J]. 王海臻,蔡丹純,廖丹丹,鐘梅,高云飛,盛超.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(05)
[2]秀麗隱桿線蟲(chóng)神經(jīng)免疫相互作用的研究進(jìn)展[J]. 蔡金玲,蔡金玲,杜麗,馬瓊,崔玉芳.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2012(09)
[3]秀麗隱桿線蟲(chóng)的培養(yǎng)與保存研究[J]. 李有全,關(guān)貴全,彭欲率,何海寧,羅建勛,殷宏.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2011(10)



本文編號(hào):3585933

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