目的觀察脫氧膽酸對線蟲生存和生長發(fā)育的影響,了解脫氧膽酸的作用。方法實驗對象分為對照組和實驗組,其中實驗組分為低濃度組、中濃度組和高濃度組。將L1期線蟲放于實驗組中培養(yǎng)48 h后觀察不同濃度的脫氧膽酸對線蟲生長的影響,在D0期（幼年成蟲期）、D4期（線蟲成年后第4天）、D6期（線蟲成年后第6天）觀察不同濃度的脫氧膽酸對線蟲運動能力、抗感染能力、壽命和生殖能力的影響。結(jié)果不同濃度的脫氧膽酸對線蟲生長的影響未見明顯差異。在不同時間、不同濃度脫氧膽酸的作用下,線蟲運動能力隨著劑量的增加和時間的延長而降低,中高濃度脫氧膽酸可縮短線蟲的壽命和降低抗感染能力,并呈劑量依賴性。高濃度的脫氧膽酸可以減少線蟲的子代及縮短線蟲的產(chǎn)卵時間。結(jié)論脫氧膽酸不影響線蟲的生長。大劑量的脫氧膽酸對線蟲可能存在量效和時效的生殖毒性作用和慢性毒性作用,縮短線蟲的壽命,降低線蟲的運動及抗感染能力,其作用機制仍需進一步研究。 

【文章來源】：中國微生態(tài)學雜志. 2019,31(05)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

圖１脫氧膽酸化學結(jié)構(gòu)圖

圖２線蟲生長周期菌ＯＰ５０ＮＧＭ培養(yǎng)基上，每組設(shè)置３個平行，每板１００條左右線蟲。待線蟲于ＮＧＭ培養(yǎng)基上培養(yǎng)４８ｈ后，計數(shù)培養(yǎng)基中存活的線蟲數(shù)，并在顯微鏡下觀察計數(shù)存活線蟲中各個發(fā)育階段的線蟲數(shù)。１．２．５．２線蟲的體長將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組培養(yǎng)基上，待其發(fā)育到Ｌ４期，用１０％水合氯醛麻醉線蟲，用體式顯微鏡測量線蟲體長。每個培養(yǎng)基上測量１０條線蟲。１．２．６線蟲生存實驗１．２．６．１線蟲壽命將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組的普通培養(yǎng)基上，待其發(fā)育至Ｌ４期，轉(zhuǎn)移到加有ＦＵＤＲ（５－氟尿嘧啶脫氧核苷）的實驗組培養(yǎng)基上，每天觀察，記錄存活和死亡的線蟲數(shù)，以及觀察的時間，直到線蟲全部死亡。１．２．６．２線蟲運動能力將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組培養(yǎng)基上，分別觀察Ｄ０期（幼年成蟲期，一般４８ｈ）、Ｄ４期（線蟲成年后的第４天）、Ｄ６期（線蟲成年后的第６天）的線蟲每分鐘咽部抽吸頻率（ｐｕｍｐｉｎｇ／ｍｉｎ）以及每分鐘液體中的擺動頻率（ｔｈｒａｓｈ／ｍｉｎ）（將線蟲放于新鮮的大腸埃希菌ＯＰ５０上計數(shù)每分鐘咽部抽吸頻率；將線蟲放于裝有２ｍＬ無菌Ｍ９溶液的培養(yǎng)皿中計數(shù)每分鐘液體中的擺動頻率）。１．２．６．３線蟲抗感染能力將已活化的ＰＡ１４菌株涂在加有ＦＵＤＲ培養(yǎng)基上，放于３７℃的恒溫培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)，然后放于２５℃培養(yǎng)箱中放置１０ｈ，待用。將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組的普通培養(yǎng)基上，待其發(fā)育至Ｌ４期，轉(zhuǎn)移到加有ＦＵＤＲ并

圖２線蟲生長周期菌ＯＰ５０ＮＧＭ培養(yǎng)基上，每組設(shè)置３個平行，每板１００條左右線蟲。待線蟲于ＮＧＭ培養(yǎng)基上培養(yǎng)４８ｈ后，計數(shù)培養(yǎng)基中存活的線蟲數(shù)，并在顯微鏡下觀察計數(shù)存活線蟲中各個發(fā)育階段的線蟲數(shù)。１．２．５．２線蟲的體長將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組培養(yǎng)基上，待其發(fā)育到Ｌ４期，用１０％水合氯醛麻醉線蟲，用體式顯微鏡測量線蟲體長。每個培養(yǎng)基上測量１０條線蟲。１．２．６線蟲生存實驗１．２．６．１線蟲壽命將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組的普通培養(yǎng)基上，待其發(fā)育至Ｌ４期，轉(zhuǎn)移到加有ＦＵＤＲ（５－氟尿嘧啶脫氧核苷）的實驗組培養(yǎng)基上，每天觀察，記錄存活和死亡的線蟲數(shù)，以及觀察的時間，直到線蟲全部死亡。１．２．６．２線蟲運動能力將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組培養(yǎng)基上，分別觀察Ｄ０期（幼年成蟲期，一般４８ｈ）、Ｄ４期（線蟲成年后的第４天）、Ｄ６期（線蟲成年后的第６天）的線蟲每分鐘咽部抽吸頻率（ｐｕｍｐｉｎｇ／ｍｉｎ）以及每分鐘液體中的擺動頻率（ｔｈｒａｓｈ／ｍｉｎ）（將線蟲放于新鮮的大腸埃希菌ＯＰ５０上計數(shù)每分鐘咽部抽吸頻率；將線蟲放于裝有２ｍＬ無菌Ｍ９溶液的培養(yǎng)皿中計數(shù)每分鐘液體中的擺動頻率）。１．２．６．３線蟲抗感染能力將已活化的ＰＡ１４菌株涂在加有ＦＵＤＲ培養(yǎng)基上，放于３７℃的恒溫培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)，然后放于２５℃培養(yǎng)箱中放置１０ｈ，待用。將發(fā)育至Ｌ１期的線蟲放到對照組和實驗組的普通培養(yǎng)基上，待其發(fā)育至Ｌ４期，轉(zhuǎn)移到加有ＦＵＤＲ并

【參考文獻】：
期刊論文
[1]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導滋養(yǎng)細胞凋亡在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥中的作用及機制[J]. 王海臻,蔡丹純,廖丹丹,鐘梅,高云飛,盛超.  南方醫(yī)科大學學報. 2018(05)
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