P-選擇素（P-selectin）存在于血小板a顆粒膜表面和血管內(nèi)皮細胞Weibel-Palade小體內(nèi)，當血小板或內(nèi)皮細胞受刺激活化時，胞漿內(nèi)的α顆粒或Weibel-Palade小體與細胞膜融合，因此細胞膜表面P-Selectin表達量的增加可作為血小板和內(nèi)皮細胞活化的特異性標志。 為了用單克隆抗體親和層析方法從人血小板破碎液中純化血小板P-選擇素，將單克隆抗體SZ-51-IgG與溴化氰活化的Sepharose4B凝膠連接成Sz-51-IgG-Sepharose4B親和層析柱，人血小板破碎液經(jīng)此親和層析柱上樣后，再經(jīng)FPLC系統(tǒng)獲得所要的產(chǎn)品。產(chǎn)品經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定其純度，用點雜交鑒定其生物學活性。結(jié)果顯示，SZ-51-Sepharose4B親和層析柱的偶聯(lián)率為68％，每1m1（約1×10⁹個血小板）血小板破碎液中可以純化到12μg P-selectin，所得產(chǎn)品經(jīng)10％SDS-PAGB，在分子量約為140KD處顯單一的蛋白區(qū)帶，經(jīng)點雜交印跡顯示產(chǎn)品與單抗SZ-51反應顯帶。因此用單克隆抗體親和層析柱純化的P-selectin產(chǎn)品得率高、純度... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
一 中文摘要
二 英文摘要
三 正文部分:
    引言
    第一部分 單克隆抗體SZ-51偶聯(lián)的親和層析柱純化人血小板P-選擇素
    第二部分 抗人血小板P-選擇素單抗(SZ-51)的熒光素標記及其臨床應用
    第三部分 FITC標記的SZ-51檢測H_2O_2誘導HUVEC P-選擇素的表達及阿魏酸的影響作用
四 結(jié)論
五 參考文獻
六 附錄
    附錄一 縮略詞表
    附錄二 學習期間發(fā)表的學術論文
    附錄三 致謝



本文編號：3578050