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FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鑒定及骨髓造血干細(xì)胞表型初步分析

發(fā)布時(shí)間:2022-01-08 10:32
  目的繁育和鑒定FOXO3A基因敲除小鼠,選育的FOXO3A基因敲除雜合型小鼠用于保種,純合型小鼠用于實(shí)驗(yàn)。初步分析FOXO3A基因敲除對小鼠造血細(xì)胞表型的影響,為后續(xù)FOXO3A基因?qū)υ煅?xì)胞損傷的調(diào)節(jié)研究奠定基礎(chǔ)。方法雜合型雌鼠與野生型雄鼠交配,選育出雜合型雌鼠和雜合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄兩雌同籠合養(yǎng)方式進(jìn)行繁育獲得純合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾標(biāo)號(hào),剪尾提取基因組DNA,采用PCR方法進(jìn)行基因型鑒定,鑒定獲得100 bp/186 bp兩條條帶的為雜合型小鼠(FOXO3A+/-),鑒定獲得186 bp條帶的為純合型小鼠(FOXO3A-/-),鑒定獲得100 bp條帶的為野生型小鼠(FOXO3A+/+,WT);采用流式細(xì)胞術(shù)對鑒定出的野生型和純合型小鼠進(jìn)行骨髓細(xì)胞分型分析。結(jié)果 FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鑒定,子代基因敲除純合型小鼠與雜合型小鼠長勢正常,與野生型FVB/N小鼠相比外觀、生長發(fā)育未見明顯差異;已得到一定數(shù)量的純合型小鼠用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);骨髓細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示,FOXO3A基因敲除純合型小鼠骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)與野生型小鼠相比[(6. 167±1. 424) vs.(10±1... 

【文章來源】:中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019,29(01)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 小鼠基因型鑒定
        1.3.2 骨髓細(xì)胞檢測分析
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 小鼠的繁殖情況
    2.2 小鼠基因型鑒定
    2.3 小鼠的生長情況
    2.4 FOXO3A基因敲除小鼠骨髓計(jì)數(shù)結(jié)果
    2.5 FOXO3A基因敲除小鼠造血細(xì)胞表型分析結(jié)果
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本文編號(hào):3576396

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