目的水的跨膜轉(zhuǎn)運對維持細(xì)胞的正常代謝具有重要作用。1992年以來大量研究證實機體內(nèi)廣泛存在著特異性的水通道蛋白家族（Aquaporins，AQPs）。AQP1在體內(nèi)扮演著重要角色，參與滲透壓驅(qū)動下的水的轉(zhuǎn)運，介導(dǎo)藥理作用，和參與水腫的形成等。但AQP1與凋亡之間是否存在著聯(lián)系，現(xiàn)在還有爭議。本實驗應(yīng)用特異性靶向AQP1表達基因的siRNA（short interfering RNA），抑制小鼠Balb／c 3T3成纖維細(xì)胞的AQP1的表達。并通過觀察α-溶血素對這種AQP1表達受抑制的細(xì)胞所造成的表型變化，初步探討AQP1在細(xì)胞凋亡中的作用。方法1、實驗分三組：normal cell組，為正常細(xì)胞；control-RNAi組，為非特異性靶向AQP1的siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞；AQP1-RNAi組，為特異性靶向AQP1的siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。應(yīng)用α-溶血素（30ug／ml）作用于細(xì)胞，4h后觀察細(xì)胞的表型的變化。2、western blot檢測AQP1蛋白量，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，流式細(xì)胞術(shù)檢驗細(xì)胞凋亡率。結(jié)果1、利用RNAi轉(zhuǎn)染技術(shù)抑制成纖維細(xì)胞Balb／c3T3的AQP1表達，w... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

柱狀圖表示各組AQPI表達所占normolcen組的相對百分比

未加a一溶血素，倒置顯微鏡觀normaleell組x200，b:eontrol一RNAi組各組細(xì)胞在形態(tài)上無明顯變化，組間無顯

RNAi組發(fā)生變化的細(xì)胞及脫落細(xì)胞的數(shù)目較其余兩組多，且細(xì)胞變圓、皺縮也較其余兩組變化顯著(圖4)。圖3，未加a一溶血素，倒置顯微鏡觀察各組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。a: normaleell組x200，b:eontrol一RNAi組x200，e:AQPI一RNAi組x200。各組細(xì)胞在形態(tài)上無明顯變化，組間無顯著差異。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Inhibitory effect of topiramate on Lewis lung carcinoma metastasis and its relation with AQP1 water channel[J]. Bing MA, Yang XIANG, Tao LI, He-ming YU, Xue-jun LIDepartment of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Peking University, Beijing 100083; National Research Institute for Family Planning, Beijing 100081, China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(01)
[2]水通道蛋白1和5在急性肺損傷大鼠的表達[J]. 焦光宇,李爾然,于潤江.  中華內(nèi)科雜志. 2003(06)



本文編號：3570808