完整的內(nèi)皮屏障對維持正常的血液循環(huán)和組織器官的正常功能具有十分重要的作用。內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高是炎性反應(yīng)的重要特點,是微血管功能障礙的主要表現(xiàn),也是引起組織缺氧和細(xì)胞代謝障礙的重要原因之一。內(nèi)皮細(xì)胞通透性改變的機(jī)制及其調(diào)控十分復(fù)雜,涉及眾多炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子、受體及信號傳導(dǎo)系統(tǒng)。迄今為止,雖然國內(nèi)外對此進(jìn)行了大量研究,對內(nèi)皮細(xì)胞通透性調(diào)控機(jī)制也取得了較為深入的認(rèn)識,但其確切機(jī)理尚未完全闡明。而且,目前的研究多采用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)方法,利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究內(nèi)皮細(xì)胞通透性的相關(guān)蛋白質(zhì),國內(nèi)外尚鮮見報道。由于內(nèi)毒素（LPS）是常見的致炎物質(zhì),組織胺則是內(nèi)源性炎癥介質(zhì),兩者均可導(dǎo)致微血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高,但兩者作用存在較大差異。本實驗首先研究內(nèi)毒素血癥時大鼠肺、腸組織微血管通透性的改變及內(nèi)毒素和組織胺對體外培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響,并在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用雙向電泳、圖象分析和質(zhì)譜分析等蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究通透性相關(guān)的蛋白質(zhì)組改變,探討LPS和組織胺作用下體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞蛋白表達(dá)的差異性。主要結(jié)果及結(jié)論如下: 1.在大鼠內(nèi)毒素血癥模型上,5 mg/kg和10 mg/kg LPS均可造... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

內(nèi)皮細(xì)胞接種后96h，細(xì)胞形態(tài)呈梭形或鵝卵石樣，10x10

子免疫組化鑒定，95%以上的內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)存在棕即姍因子陽性細(xì)胞，并且可見核分裂相，10X40。內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響均可引起內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加，并呈劑量依賴性10一mofL/組織胺可以顯著增加內(nèi)皮細(xì)胞的LPS和組織胺對單層內(nèi)皮細(xì)胞通透速率的影響(下3，LPS(pg/ml)110100組.558士0一0250.613士0.0730.669士0.087*0.588士0.1090.05，**尸<.001

用AO一EB染色后，活細(xì)胞的胞核呈綠色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，胞漿有紅一橙色顆粒;凋亡細(xì)胞可見細(xì)胞收縮變圓，整個細(xì)胞呈均勻的綠色;壞死細(xì)胞則呈明亮的紅色。對照組細(xì)胞生長正常，無凋亡和壞死細(xì)胞出現(xiàn)(圖5)。1pgLPS和10pgLPs處理后可見個別凋亡細(xì)胞(圖6，7)，而100協(xié)gLPS處理后凋亡細(xì)胞增多，并可出現(xiàn)壞死細(xì)胞(圖8)。10.7mouL組織胺作用下內(nèi)皮細(xì)胞基本正常(圖9)，10一6molL/組織胺可使細(xì)胞收縮變圓，出現(xiàn)凋亡早期表現(xiàn)(圖10)，而10一smolL/組織胺作用后則可見有凋亡晚期或壞死細(xì)胞出現(xiàn)(圖11)。圖5對照組細(xì)胞經(jīng)AO一EB染色，可見細(xì)胞生長正常，圖6無凋亡或壞死細(xì)胞。lp創(chuàng)mlLPS處理內(nèi)皮細(xì)胞后

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3562119