目的探討特異性位點(diǎn)生物素化蛋白的制備技術(shù)。方法采用分子克隆法,將編碼Avi標(biāo)簽（AviTag）的基因序列插入真核表達(dá)載體,構(gòu)建表達(dá)AviTag的gp120重組質(zhì)粒,使融合蛋白羧基段帶AviTag。采用生物素蛋白連接酶將活化生物素連接到融合蛋白的AviTag多肽位點(diǎn),采用酶切、Western blot和ELISA等方法分析制備是否成功。結(jié)果酶切和Western blot證實(shí)gp120-AviTag表達(dá)載體構(gòu)建和表達(dá)成功。ELISA結(jié)果顯示生物素成功標(biāo)記于融合蛋白的AviTag多肽位點(diǎn)。結(jié)論將AviTag引入表達(dá)載體可成功制備特異性位點(diǎn)生物素化蛋白,為生發(fā)中心抗原特異性B細(xì)胞反應(yīng)的研究提供技術(shù)支持。 

【文章來(lái)源】：江蘇醫(yī)藥. 2019,45(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
    二、方法
結(jié) 果
    一、HIV BC亞型gp120-AviTag質(zhì)粒的構(gòu)建
    二、HIV BC亞型gp120-AviTag的表達(dá)和純化
    三、HIV BC亞型gp120-AviTag的生物素標(biāo)記
討 論



本文編號(hào)：3553959