利用細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞工程及分子生物學(xué)技術(shù)系統(tǒng)地研究了人白細(xì)胞間素2（IL-2）的細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)，制備了一組生物學(xué)特性多樣化的抗IL-2單克隆抗體（McAb），對IL-2及其McAb的實(shí)驗(yàn)室和臨床應(yīng)用也進(jìn)行了探討，主要取得了以下結(jié)果： 一、探討了與建立穩(wěn)定的IL-2生物活性測定體系有關(guān)的若干問題：在解決了IL-2依賴株細(xì)胞凍存和復(fù)蘇困難的問題的同時(shí)，又建立了以大鼠脾臟母細(xì)胞（RB）為基礎(chǔ)的IL-2測活方法，彌補(bǔ)了依賴株和小鼠脾臟母細(xì)胞測活方法中的缺陷。建立了一個(gè)穩(wěn)定、有效的、以依賴株方法為主，RB方法為輔的IL-2生物學(xué)活性測定體系。 二、系統(tǒng)研究了人扁桃體淋巴細(xì)胞（TLC）和Jurkat細(xì)胞系產(chǎn)生IL-2的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，實(shí)現(xiàn)了IL-2超誘導(dǎo)制備，最大制備滴度可達(dá)3,000u／ml。對超誘導(dǎo)制備的機(jī)制也進(jìn)行了探討。 三、研究了Jurkat細(xì)胞克隆化的促進(jìn)因素；經(jīng)連續(xù)克隆化，篩選，建立了穩(wěn)定、高產(chǎn)的IL-2分泌株，JurkatⅡ-3。其產(chǎn)生IL-2的水平與國外報(bào)道的水平相一致，最大分泌活性可達(dá)3,000u／ml。 四、利用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)和引進(jìn)的IL... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文提要
英文提要
前言
文獻(xiàn)回顧
    1、IL-2的基因及分子生物學(xué)
        1.1 IL-2的基因組成和表達(dá)
        1.2 IL-2的分子結(jié)構(gòu)
        1.3 IL-2的受體結(jié)合位點(diǎn)
        1.4 IL-2的細(xì)胞生物學(xué)
        1.5 IL-2與癌基因和人類T細(xì)胞白血病病毒(HTLV)的關(guān)系
    2.抗IL-2單克隆抗體的制備、生物學(xué)特征及其應(yīng)用研究的進(jìn)展
        2.1 抗IL-2 McAb制備的研究概況
        2.2 抗IL-2雜交瘤細(xì)胞系建立中的幾個(gè)具體問題
        2.3 抗IL-2 McAb的生物學(xué)特性
        2.4 抗IL-2 McAb的應(yīng)用
    3.IL-2的應(yīng)用前景和方向
        3.1 用于腫瘤的治療
        3.2 用于感染性疾病的治療
        3.3 作為新佐劑用于增強(qiáng)亞單位疫苗的預(yù)防效力
        3.4 制備IL-2類似物,用于臨床治療
研究內(nèi)容
    第一部分 IL-2生物學(xué)的研究
        一、IL-2生物學(xué)測活方法若干問題的再探討
        二、IL-2細(xì)胞分泌的動(dòng)態(tài)、超誘導(dǎo)制備及其機(jī)制的探討
        三、Jurkat細(xì)胞克隆化及IL-2高產(chǎn)株的建立
        四、基因重組IL-2在大腸桿菌中的高效表達(dá)
    第二部分 抗IL-2多價(jià)及單克隆抗體的制備及其生物學(xué)特性
        一、抗IL-2高效價(jià)抗血清及單克隆抗體的制備
        二、用親和力排列和親和指數(shù)確定抗IL-2單克隆抗體的用途
        三、抗IL-2多價(jià)及單克隆抗體的生物學(xué)特征
        四、用簡便的排阻ELISA快速確定抗IL-2單克隆抗體的構(gòu)象表位相關(guān)性
    第三部分 抗IL-2多價(jià)及單克隆抗體的應(yīng)用研究
        一、用單克隆抗體研究IL-2及其改構(gòu)體的功能域和抗原性
        二、用單克隆抗體確定IL-2分泌細(xì)胞及其臨床應(yīng)用的初步研究
        三、測定人IL-2的ELISA及其影響因素的探討
    第四部分 IL-2抗腫瘤和抗感染的臨床及實(shí)驗(yàn)研究
        一、IL-2誘導(dǎo)的LAK細(xì)胞及其臨床試用
        二、IL-2抗結(jié)核桿菌的實(shí)驗(yàn)研究
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)



本文編號：3539694