大鼠輸卵管特殊糖蛋白基因片段的擴(kuò)增、克隆與序列分析
發(fā)布時(shí)間:2021-11-29 06:14
目的:大鼠輸卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的擴(kuò)增、克隆及序列分析。方法:在Genebank中查找到已知的小鼠、金倉(cāng)鼠、豬和人的輸卵管特殊糖蛋白的基因序列并運(yùn)用PrimerPremier5.0軟件對(duì)這些輸卵管特殊糖蛋白的基因序列進(jìn)行同源性分析。依據(jù)同源性較大的保守區(qū)基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物,并提取大鼠輸卵管總RNA作為模板進(jìn)行RTPCR,得到一條cDNA片段。將產(chǎn)物連接到T載體中,轉(zhuǎn)化、擴(kuò)增重組質(zhì)粒。提取大腸桿菌中的重組質(zhì)粒進(jìn)行DNA測(cè)序。將DNA測(cè)序所得到的基因序列和已知的小鼠、金倉(cāng)鼠、牛、羊及人的輸卵管特殊糖蛋白的基因序列進(jìn)行同源性分析。結(jié)果:利用RTPCR的方法擴(kuò)增出一條120bp的目的基因片段,測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)其和小鼠、金倉(cāng)鼠、牛、羊和人的輸卵管特殊糖蛋白的核苷酸序列的同源性分別為90%,90%,78%,87%。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)所獲得的基因序列為目前尚未見(jiàn)報(bào)道的大鼠輸卵管糖蛋白的基因序列的一部分。
【文章來(lái)源】:武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2005,(03)
【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)
本文編號(hào):3525999
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