人胎盤來源的造血干細胞和間充質干細胞的分離及鑒定
發(fā)布時間:2021-11-27 09:48
目的建立人胎盤來源的造血干細胞(placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs)和間充質干細胞(placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs)的分離方法,并進行鑒定和組分分析。方法選取10份新生健康嬰兒胎盤組織,采用機械破碎法聯(lián)合磁珠分選法分離h P-HSCs,胎盤絨毛膜組織塊貼壁法分離hP-MSCs,利用形態(tài)學觀察、集落培養(yǎng)、流式細胞術等進行鑒定。結果 hP-HSCs:分離后有核細胞數(shù)(total nucleated cell number,TNC)為(11. 82±2. 46)×108個,TNC回收率≥80%;細胞活性為(99. 7±0. 3)%;細胞表面抗體CD34+CD45dim表達率為(8. 69±0. 36)%,CD34+總數(shù)為(108. 0±6. 48)×106個;集落形成總數(shù)為(1. 88±1. 07)×106。hP-MSCs:凍存細胞總數(shù)為(40. 78±9. 35)×10
【文章來源】:中國生物制品學雜志. 2019,32(01)CSCD
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 胎盤組織
1.2 主要試劑及儀器
1.3 h P-HSCs的分離
1.3.1 機械破碎法
1.3.2 磁珠分選
1.4 h P-MSCs的分離制備
1.5 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
1.6 h P-MSCs的傳代培養(yǎng)
1.7 細胞表面抗體的檢測
1.7.1 分選后的CD34+細胞的流式檢測
1.7.2 hP-MSCs的流式檢測
1.8 h P-MSCs成脂、成骨誘導分化
2 結果
2.1 h P-HSCs的分離
2.2 h P-MSCs的分離
2.3 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
2.4 磁珠分選后CD34+細胞和h P-MSCs的流式細胞術檢測結果
2.5 h P-MSCs的成脂、成骨誘導分化
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]3種組織來源的間充質干細胞體外成骨能力的比較[J]. 趙剛,劉微微,高偉瑋,馬潔. 基礎醫(yī)學與臨床. 2017(10)
[2]人臍帶非酶解法培養(yǎng)MSCs的方法建立[J]. 李素萍,王震,王超,王永珍,周學勇,吳學忠,楊宏友,呂蓉. 中國輸血雜志. 2017(08)
[3]人胎盤絨毛膜間充質干細胞分離培養(yǎng):組織塊法的優(yōu)化[J]. 金宇林,吳潔瑩,陸琰,陳勁松,李發(fā)濤,唐婕,劉東,梁綺華,李焱,湯雪薇,謝閨娥,吳韶清. 中國組織工程研究. 2017(21)
[4]二次貼壁法高效制備人臍帶間充質干細胞[J]. 蘆慧穎,杜文敬,劉春香,孟慶雪,付寅生,石佳寧,張婷婷,張怡. 中國生物制品學雜志. 2017(06)
[5]不同培養(yǎng)方法對人臍帶間充質干細胞的影響[J]. 劉奉,蔣祥林,劉明明. 中國組織工程研究. 2016(28)
[6]人臍帶和胎盤來源的干細胞分離鑒定及其組份分析[J]. 周勝利,鄭超,蘇建強,戚媛紅,司正凱. 中國實驗血液學雜志. 2015(06)
[7]胎盤組織及血液中含有豐富的造血干/祖細胞[J]. 周勝利,宋劍秋,旭日. 中國實驗血液學雜志. 2002(02)
[8]深低溫凍存十六年后臍血造血干細胞活性的檢測[J]. 時慶,侯懷水,鞠秀麗,李棟,沈柏均. 中華血液學雜志. 2008 (08)
碩士論文
[1]胎盤來源造血干細胞分離提取和體外擴增研究[D]. 李猛.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2017
本文編號:3522030
【文章來源】:中國生物制品學雜志. 2019,32(01)CSCD
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 胎盤組織
1.2 主要試劑及儀器
1.3 h P-HSCs的分離
1.3.1 機械破碎法
1.3.2 磁珠分選
1.4 h P-MSCs的分離制備
1.5 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
1.6 h P-MSCs的傳代培養(yǎng)
1.7 細胞表面抗體的檢測
1.7.1 分選后的CD34+細胞的流式檢測
1.7.2 hP-MSCs的流式檢測
1.8 h P-MSCs成脂、成骨誘導分化
2 結果
2.1 h P-HSCs的分離
2.2 h P-MSCs的分離
2.3 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
2.4 磁珠分選后CD34+細胞和h P-MSCs的流式細胞術檢測結果
2.5 h P-MSCs的成脂、成骨誘導分化
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]3種組織來源的間充質干細胞體外成骨能力的比較[J]. 趙剛,劉微微,高偉瑋,馬潔. 基礎醫(yī)學與臨床. 2017(10)
[2]人臍帶非酶解法培養(yǎng)MSCs的方法建立[J]. 李素萍,王震,王超,王永珍,周學勇,吳學忠,楊宏友,呂蓉. 中國輸血雜志. 2017(08)
[3]人胎盤絨毛膜間充質干細胞分離培養(yǎng):組織塊法的優(yōu)化[J]. 金宇林,吳潔瑩,陸琰,陳勁松,李發(fā)濤,唐婕,劉東,梁綺華,李焱,湯雪薇,謝閨娥,吳韶清. 中國組織工程研究. 2017(21)
[4]二次貼壁法高效制備人臍帶間充質干細胞[J]. 蘆慧穎,杜文敬,劉春香,孟慶雪,付寅生,石佳寧,張婷婷,張怡. 中國生物制品學雜志. 2017(06)
[5]不同培養(yǎng)方法對人臍帶間充質干細胞的影響[J]. 劉奉,蔣祥林,劉明明. 中國組織工程研究. 2016(28)
[6]人臍帶和胎盤來源的干細胞分離鑒定及其組份分析[J]. 周勝利,鄭超,蘇建強,戚媛紅,司正凱. 中國實驗血液學雜志. 2015(06)
[7]胎盤組織及血液中含有豐富的造血干/祖細胞[J]. 周勝利,宋劍秋,旭日. 中國實驗血液學雜志. 2002(02)
[8]深低溫凍存十六年后臍血造血干細胞活性的檢測[J]. 時慶,侯懷水,鞠秀麗,李棟,沈柏均. 中華血液學雜志. 2008 (08)
碩士論文
[1]胎盤來源造血干細胞分離提取和體外擴增研究[D]. 李猛.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2017
本文編號:3522030
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