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脂多糖通過TLR4參與小鼠脂肪性肝損傷模型炎癥反應(yīng)觀察

發(fā)布時(shí)間:2021-11-21 06:48
  目的:研究在小鼠脂肪性肝損傷中脂多糖(LPS)參與肝臟炎癥反應(yīng)的機(jī)制。方法:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用30只雄性ICR小鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組、造模第3天組、造模第7天組、造模第14天組、造模第28天組,每組6只。對(duì)照組飼喂正常飼料,4個(gè)造模組飼喂蛋氨酸膽堿缺乏聯(lián)合高脂飼料建立小鼠脂肪性肝損傷模型。造模后取肝臟采用ELISA法檢測(cè)LPS含量; qRT-PCR法檢測(cè)Toll樣受體4 (TLR4) mRNA的表達(dá);免疫熒光染色觀察TLR4蛋白的分布。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)采用從小鼠骨髓分離培養(yǎng)的單核/巨噬細(xì)胞,分為對(duì)照組和LPS組,分別用PBS或LPS刺激6 h后采用qRT-PCR法檢測(cè)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(i NOS)、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1β(MIP-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6) mRNA的表達(dá); ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中MCP-1蛋白的含量。結(jié)果:5組小鼠肝組織中LPS含量比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0. 313);與對(duì)照組比較,造模第14、28天組肝組織中TLR4 mRNA表達(dá)增加(P <0. 05)... 

【文章來源】:鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019,54(03)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑
    1.2 小鼠脂肪性肝損傷模型的建立
    1.3 小鼠單核/巨噬細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
    1.4 小鼠肝組織中LPS檢測(cè)和單核/巨噬細(xì)胞中MCP-1蛋白檢測(cè)
    1.5 小鼠肝組織HE染色
    1.6 小鼠肝組織中Toll樣受體4 (TLR4) 蛋白的免疫熒光染色
    1.7 小鼠肝組織中TLR4和單核/巨噬細(xì)胞中炎癥因子mRNA表達(dá)水平的檢測(cè)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 5組小鼠肝組織中LPS含量及TLR4 mRNA表達(dá)的比較
    2.2 小鼠肝組織HE染色和TLR4蛋白免疫熒光染色結(jié)果
    2.3 對(duì)照組和LPS組各炎癥因子mRNA及MCP-1蛋白表達(dá)的比較
3 討論



本文編號(hào):3508996

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